采用大鼠右侧纹状体定位注射大鼠脑胶质瘤C6细胞，建立大鼠脑胶质瘤模型。手术后第11天，所有大鼠进行小动物核磁共振（MRI）评价，观察肿瘤生长情况。选择造模成功的10只大鼠随机分为2组，每组5只，分别为模型组和替莫唑胺组。此外，另有5只注射空白细胞培养基的大鼠作为假手术组。从手术后第11天起，替莫唑胺组大鼠每日灌胃给予替莫唑胺给药液（20 mg/kg），连续5天。手术后第18天，所有大鼠再次进行MRI评价，记录肿瘤生长情况。第二次MRI评价后，进行大鼠血浆和脑组织样品的取材。大鼠脑组织进行肿瘤组织、癌旁组织（距离肿瘤组织小于2 cm）和正常脑组织的分离。各组织在液氮中冷冻后，分别置于-80℃冰箱保存。
脑组织匀浆液或血浆前处理后进行UHPLC-Q-TOF-MS分析。仪器使用Agilent 1290 UPLC和6550 Q-TOF系统。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse PlusC18 column (2.1×50 mm, 1.8 µm)。流动相A为含0.2%甲酸和10mM甲酸铵的水溶液，流动相B为含0.2%甲酸和10mM甲酸铵的甲醇溶液，以0.4 ml/min进行梯度洗脱。柱温设置45 ℃，进样体积为10 μl。质谱采用ESI源，正离子模式检测。扫描范围为600-2000 Da，MS/MS碰撞能量为20、40和60 eV。