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金黄色葡萄球菌检验的操作步骤介绍

2022.3.03

  1.增菌:取 1:10 稀释的样品 10mL 接种到 90mL SCDLP 液体培养基中,置 36℃±1℃培养箱,培养 24h±2h。

  注:如无此培养基也可用 7.5%氯化钠肉汤。

  2.分离:自上述增菌培养液中,取 1—2 接种环,划线接种在 Baird Parker 平板培养基,如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板,置 36℃±1℃培养 48h。在血琼脂平板上菌落呈金黄色,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在 Baird Parker 平板培养基上为圆形,光滑,凸起,湿润,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无 混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上,置 36℃±1℃培养 24h±2h。

  3.染色镜检:挑取分纯菌落,涂片,进行革兰氏染色,镜检。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌,排列成葡萄状,无芽胞,无荚膜,致病性葡萄球菌,菌体较小,直径约为 0.5μm—1μm。

  4.甘露醇发酵试验:取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中,在培养基液面上加入高度为 2mm—3mm 的灭菌液体石蜡,置 36℃±1℃培养 24h±2h,金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。

  5.血浆凝固酶试验:吸取1:4新鲜血浆0.5mL,置于灭菌小试管中,加入待检菌24h±2h肉汤培养物0.5mL。混匀,置36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中,每半小时观察一次,6h之内如呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各0.5mL,分别加入无菌1:4血浆0.5mL,混匀,作为对照。

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