对寄生虫病的检验浅析
寄生虫病是临床常见的疾病，不但对广大人民群众的健康造成很大危害，而且影响到畜牧业的发展。寄生虫的实验诊断包括对受感染的机体进行检测和病原体的特性进行检验，实验室检验在寄生虫病的诊断中起着极其重要的作用。常规病原学检查是直接检验受感染者的粪便、血液、组织液镜检或体外培养后再镜检以得到寄生虫为确诊依据。近些年来，这种传统的方法越来越少用，免疫学或分子生物学寄生虫诊断方法在临床上得到了迅速的发展。
寄生虫是一病原体，如单细胞生物(原虫）或蠕虫，它们通过寄生于其他生物体(宿主）内以得以生存。寄生虫病是临床常见的疾病，不但对广大人民群众的健康造成很大危害，而且影响到畜牧业的发展。我国幅员辽阔，地跨亚热带和南、北温带，生境复杂，气候多样，寄生虫的种类比较复杂和多样。寄生虫的实验诊断包括对受感染的机体进行检测和病原体的特性进行检验，如检测抗体、抗原、酶、核酸。传统的检测方法和现代技术发展而来的免疫学和分子生物学在临床应用中都有优缺点，如直接境检简单、快速，但其准确性和局限性是其缺点，本文就其进行浅析。
1.传统的检测方法
粪便生理盐水直接涂片法、薄血膜法、沉淀法、饱和盐水浮聚法、厚血膜法、厚涂片法等诸多传统的实验室检查方法至今仍在寄生虫的诊断中扮演着重要的角色。在寄生虫感染中，在患者的体液或分泌排泄物中找到虫体、包囊、卵囊或虫卵，或在患者病变部位的组织活检标本中找到虫体或虫卵而确诊，可谓是临床诊断的“金标准”。根据寄生虫的种类和在人体的发育阶段和寄生部位的不同，可采集相应的标本，如粪便、血液、尿液、痰液、阴道分泌物等，采取不同的检查方法。
对于多数的蠕虫和节肢动物，常肉眼可见，通常只需要根椐其标本来源和形态特征即可做出初步判断，如蛔虫；肉眼不能发现的原虫的检测多需要借助于显微镜，如隐孢子虫病患者可应用改良耐酸染色法或金胺一酚染色法检测其粪便，找到卵囊进而确诊，阿米巴痢疾患者则可在其新鲜粪便中带血的部分找到溶组织内阿米巴滋养体而确诊。
2.免疫学检测
随着科学技术的不停发展，免疫学检查在寄生虫病诊断中展现出越来越重要的价值，特别是诊断人体内不能发育成熟的寄生虫，可以弥补病原学检查的不足，随着高新技术的介入、诊断标准的标准化，免疫学检测已显示出高度的特异性、敏感性、重现性、实用性。
各虫种、虫株之间和寄生虫生活史不同发育阶段的抗原既有相同抗原，还有不同抗原是进行免疫学检查的基础。对于寄生虫的感染部位为深部器官或组织，或是早期感染、轻度感染、隐性感染或在晚期局部组织纤维化甚至成虫已死亡等情况，使病原检查十分困难，通过对血清中的抗原或抗体进行免疫学检测来帮助诊断，体现其临床的实用性。应用于免疫学诊断的抗原有虫体抗原、排泄分泌抗原和膜抗原等，按其处理的情况不同可分为粗抗原、纯化抗原、固相抗原。虫体抗原是最常用的抗原，大致可分为整体抗原和可溶性抗原。整体抗原包括虫体、幼虫和虫卵。
循环抗原是指是指寄生虫寄生在在生长发育过程中释放到宿主血液、分泌液或排泄物中，且具有抗原活性的虫源性物质，用免疫学方法可由宿主血清、脑脊液、胸腹水、乳汁、尿液等中检测到，其生化组成多为蛋白质或糖蛋白。这种检查手段在临床上应用越来越广，其释放量与寄生虫的感染程度成正比，且提示宿主体内有活的成虫。
常用的检查手段包括皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫吸附试验、间接荧光抗体试验、间接红细胞凝集试验、胶乳凝集试验、免疫印迹技术、免疫层析技术等，可将以上的方法大体归纳为皮内反应和血清学试验。皮内试验是将虫体或虫卵制备成可溶性抗原，稀释后进行皮内注射，通过形成的皮丘结果来判断阳性或阴性，阳性者对该病的诊断具有初步筛选的价值，该法简便、快速，但应注意的是存在多种寄生虫病之间的交叉反应。
3.分子生物学方法
3.1 DNA探针
DNA探针技术又被叫做分子杂交技术，是利用DNA分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性，对寄生虫某一特异性DNA序列进行探查的技术。通常是用同位素或生物素标记的特定片段作探针，与被检品的DNA或片段进行杂交，再通过放射自显影或酶检测方法检测杂交反应的结果。DNA探针方法的优点是其敏感性和特异性高，且操作简单快速，目前临床上多应用于疟疾、阴道毛滴虫感染、贾第虫病、丝虫病、利什曼原虫病、弓形虫病等的诊断。
3.2 聚合酶链反应（PCR）技术
PCR已用于多种寄生虫病诊断，PCR技术具有简易、快速、灵敏和高效等优点。PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火和适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得到迅速扩增。临床上用于疟原虫、丝虫、利什曼原虫、弓形虫、溶组织内阿米巴、锥虫、阴道毛滴虫、结节线虫、微孢子虫等的检测。
综上所述，寄生虫病是临床常见病，实验室诊断在其诊断中扮演者重要的角色，主要包括传统的镜检、免疫学检测和分子生物学的检测，他们各有优缺点，因此临床应注意鉴别。
