关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

实时定量PCR法对mRNA的检测、分析及定量的方法

2022.11.27

方法:实时定量PCR

目标RNA的类型:mRNA

同时定量的目标RNA的数量:通常为一个,但也可检测多个目标RNA,参见Stanley和Szewczuk(2005)等的研究结果,他们在单个多重反应中同时分析过72个mRNA。

用途:是检测目标RNA的一种高灵敏及高精度的方法。即使目标RNA在细胞中拷贝数极少也适用。实时PCR比其他方法更灵敏、更快、更精确。最近10年内是检测细胞中mRNA相对丰度的主要方法。不仅可用于mRNA的检测,也可用于microRNA的检测(参见Chen et al. 2005;Benes and Castoldi 2010)。

缺点:市场上销售的几种商业设备采用的检测方法不同。另外,已出版了数百种描述实时定量PCR的方案。实时PCR的每个步骤都缺乏标准,导致可靠性和可重复性的比较即使可能,也很困难(Nolanet al. 2006;Derveaux etal. 2010)。对实时PCR提出了一些合理的建议和标准,规定了实时PCR结果发表所必需的最少信息量,也许会有助于解决目前的困境(Bustinet al. 2009;Bustin 2010)。

推荐
关闭