寄生虫标本的固定与保存
蠕虫成虫的固定与保存
1、线虫
生理盐水洗净虫体粘附的污物，然后用加热至70～80℃的70%酒精或巴氏液（甲醛3份、生理盐水97份）固定，冷却后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫（旋毛虫、蛲虫、钩虫等）宜用甘油酒精（70%酒精95ml、甘油5ml）加热固定，保存于80%酒精中。也可用冰醋酸固定约半小时后移入70％酒精或甘油酒精中保存。
2、吸虫
小型吸虫可置于小瓶中，加生理盐水，用力摇荡数分钟，倒去生理盐水，注入固定液。较大的吸虫应先放在薄荷脑酒精液（薄荷脑24g、95%酒精10ml）中，使虫体肌肉松驰，用载玻片压平后固定，或将洗净后的吸虫放在两片载玻片间用细线紧扎压平后固定。一般用10%福尔马林固定，24h后移至5%福尔马林中保存，也可用70％酒精固定0.5～3h，视虫体大小而定，再移至新的70％酒精中保存。
3、绦虫
大型绦虫如猪、牛带绦虫，可将虫体浸入自来水中8～12h，使虫体在水中充分伸展、松驰，然后移至3%福尔马林溶液中固定，24～28h后转置5%福尔马林溶液中保存。小型绦虫可先在生理盐水中清洗数次，然后于3％福尔马林溶液中固定3～5h，再移入5%福尔马林溶液中保存。如需染色制片时，将虫体从上述3%福尔马林溶液中取出后置载玻片上，用另一载玻片轻压，沿载玻片边缘滴加5％福尔马林溶液固定数小时，最后移至5％福尔马林溶液中保存。
三、昆虫的保存
1、干标本的保存
系保存有翅昆虫。可用特制的昆虫针针插虫体。大型昆虫如蝇、虻等用1～3号昆虫针，从虫体背面、中胸右侧直插。注意保存左侧完整，以便鉴定。小型昆虫如：蚊、蛉、蚋、蠓等，取00号短针插入软木片的一端，然后用这个00号短针自胸部腹面、两中足基部之间插入，不可刺透胸背，再用另一长针从软木片的另一端插入，将针插好的昆虫插入昆虫盒的软木板上。盒内放入纸包的樟脑粉防蛀。
2、湿标本的保存
用于保存有翅昆虫的卵和幼虫期及其无翅昆虫和蜱螨类的发育各期。活标本先经加温70%酒（60～70℃）固定，1d后保存于甘油酒精中，也可用5%或10%福尔马林和巴氏液固定保存。
四、原虫的低温保存
用液氮保存原虫，具有保持原虫的生物学特性且保存时间较长（1～2年）的优点。现仅介绍疟原虫和阴道毛滴虫的低温保存方法。
1、冻存方法
（1）鼠疟原虫从感染疟原虫第3～4d的小鼠尾部（或心脏）取血，在1mm3阳性鼠血加0.1mm3的3.8%枸椽酸钠抗凝之后，按0.5～1.0ml分装入无菌安瓿（或塑料管）内，封口（或盖严）后，放入标明日期的纱布袋中，装于液氮罐的提筒内，立即直接置液氮中保存。
（2）阴道毛滴虫用无菌拭子取阴道分泌物，放入培养基中培养48h，转种于RPMI－1640培养基中2d。取含虫培养液经1000rpm离心10min，在沉淀中加入10%DMSO2ml，如上法分装及冻存。
2、复苏与观察需要时从液氮罐中取出保种小管，迅速投入37～40℃温水中，经4～5min即溶化。将阴道毛滴虫接种于肝浸汤培养基上，37℃培养3～4d后，涂片镜检活动的滋养体，或染色观察。冻存的鼠疟原虫，经腹腔接种小鼠，每只0.2ml，接种后4～5天取鼠尾血，涂片，姬氏液染色镜检。
