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标本溶血真的会影响凝血结果吗?

2021.6.05

标本溶血会使钾离子和一些酶等,从红细胞中释放出来,造成这些结果假性升高。因此,标本溶血对生化检验的影响是有定论的。

而网上时常有检验人提问“标本溶血会不会影响凝血结果”,可往往都没有得到令人满意的答复。而笔者恰好曾对此问题做过一点探究,也查过一些文献。因此整理出来,请大家参考。

实验探究

取三份已测完凝血,且外观无异常的标本。把管底的红细胞,分别吸到盛有约200微升自来水的日立杯中,搅动使红细胞破裂溶血,再将该混合液倒回原试管中。对第三管还用竹签在管中使劲搅动,加大溶血程度。

之后再次离心,重新测定凝血五项(仪器CA550,试剂均来自上海太阳生物),并用血球仪测定血浆层中的血红蛋白浓度。下图是第三管溶血前后外观的对比。可以看到,经过上述溶血操作血浆层变的非常红,其中血红蛋白达11 g/L,真的是很深的“血红色”了。


对比三组溶血前后的凝血结果,我发现虽然有些差异,但都很小。以溶血程度最严重的第三管为例,其前后的结果如下表(括号内为项目的参考区间)。因此,我们可以说溶血几乎不会影响凝血结果!也根本不会影响对患者的临床诊治。


此外,为了看看在极端情况下,溶血是否会对凝血结果产生影响。我又找了一份血友病患者的凝血标本,其APTT达127秒。用上述办法溶血后,APTT则是115秒。同时其余几项凝血结果,前后也无明显差异。虽然看似APTT结果有些差异,但对该血友病患者的诊断或病情的判断,实际几乎也是没有影响的。

文献报道

有读者可能会说,笔者的试验中采用的溶血方法,与标本采集过程中造成的溶血,情况并不完全一致。Ok,那我们来看看更严谨、也更详细的研究中是怎么说的。

Sweeney等研究了50例溶血的凝血标本,与短时间内重新采集的未溶血标本之间的结果差异。[1] 这些溶血标本的血浆中,血红蛋白浓度最高达7 g/L。他们分析了两组配对标本间PT与APTT的关系。

结果发现,虽然两组数据存在统计学上的差异,但都很小,不足以干扰临床判断。从下面的摘自该文的点状图中,可以清晰的看到:两组标本之间,PT的差值都不超过2秒;而APTT差值一般不超过4秒。虽然,个别的APTT差值较大,最高能达近12秒。但因为这几个标本的APTT原本就很高,所以这种程度的差异,实际也是没有临床意义的。


同时,Sweeney等还发现,溶血标本血浆中的血红蛋白含量与PT或APTT的改变之间,并无明显的关系。也就是说溶血程度最严重的标本,其PT或APTT的改变,并不一定是最大的。因此,根据标本的溶血程度来拒收或拒检凝血标本,也是没有实验数据支持的。

Lippi等通过将抗凝全血以极细的针头抽吸的方式,获得不同程度溶血的凝血标本。之后,他们考察了溶血后的血浆,对两种不同方法学的D二聚体检测的影响。[2] 结果发现,虽然在血浆中血红蛋白超过11.5 g/L时,两种D二聚体检测的结果会偏低7%左右。但是,考虑到实际工作中遇到的溶血标本,绝大多数的血浆中血红蛋白都不超过0.6 g/L。因此,Lippi等认为对溶血的标本,一般都可直接检测和报告D二聚体结果。

总结

乍一看,以上两篇文献的结论,似乎是违背“检验常识”的。在日常检验工作中,我们总是习惯于用肉眼来判断标本的溶血程度。并像保持一项古老的习俗一般,对溶血标本“不厌其烦”的备注着“重度溶血”、“中度溶血”等。却很少去思考和探究,溶血到底对凝血结果有着怎样的影响。

同时,我们总是在潜意识里认定,重度溶血的凝血标本,其结果受到的影响,肯定要大于中度或轻度溶血的。但是,通过文献[1]作者的探索,我们可以看到,这种思维其实是没有实验依据的,仅仅是一种假想和附会(epiphenomenon)。所以,套用一句名言,就是“实验是检验真理的唯一标准”。

当然,标本溶血对凝血结果并无明显影响,并不是说我们可以降低对送检标本的质量要求。而是,当一些急诊患者或特殊患者(如新生儿)的凝血标本,发现溶血后,要求重新采集送检,往往会耽误对患者的诊治,或是很不现实。因而,此时对溶血凝血标本的检测,与对结果的正确解读,就是非常有必要的了。

而笔者认为,最应当知晓“标本溶血对凝血常规标本并无明显影响”的人,应该是临床医生。假设当他看到一份备注着“标本溶血,结果仅供参考”的凝血报告时。他到底要不要“参考”这份结果,又在多大程度上“参考”呢?我想看过此文,他心里就有数了。

参考文献
[1] A C Laga, T A Cheves, J D Sweeney. The effect of specimen hemolysis on coagulation test results. American Journal of Clinical Pathology, 2006, 126: 748-755.
[2] G Lippi, P Avanzini, V Zobbi, et al. Influence of mechanical hemolysis of blood on two D-dimer immunoassays. Blood Coagulation and Fibrinolysis, 2012, 23: 461-463.


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