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自养微生物的硅胶平板分离法介绍

2022.3.15

  (1)制取硅胶平板 取等体积的盐酸(HC1比重1.09)和硅酸钠(比重1.10)溶液,徐徐加入,缓慢混合,均匀搅拌,分装于100-00 m1透析袋中.水中透析48h,其间换蒸馏水6—8次,待透析袋内的硅酸纳溶液无色透明后,高压蒸汽灭菌或过滤除菌。灌浇硅胶平板时,注意无菌操作技术,分别吸取预先配制并灭好菌的硝化细菌分离培养基1m1,酸钠溶液10ml于无菌培养皿内,静置片刻,待凝固后即可使用。

  (2)硅胶平板分离 采用涂布分离法。取0.1—0.2m1富集培养液滴于5—10个硝化细菌分离培养基硅胶平板上,涂布分离。然后将硅胶平板放在盛有少量水的干燥器里(防止水分蒸发,避免硅胶平板干裂),于28℃恒温下培养3—4月,当硅胶平板上出现硝化细菌极小的菌落后(多数菌落小于100μm),挑取10-20个单菌落,分别接种到硝化细菌增殖培养液中,28℃恒温下培养3—4周,依前述方法检验NO2-及NO3-。

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