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T4 RNA连接酶的来源和用途

2022.5.11

用途:用RNA 3'末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。

来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4噬菌体。

活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件:50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,10mM DTT,1mM ATP,10μM 5'-[P]-(A)12-18(10μM in 5'-termini)。

纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷酸酯酶。

酶储存溶液:10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X):500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃),100mM MgCl2,100mM DTT。


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