血细胞分析仪自动全血和预稀释模式的结果分析
众所周知，随着当前医疗卫生事业的不断发展，医疗诊疗设备不断进入医疗卫生机构。检验设备更是日新月异，尤其是大型全自动检验设备的投入，更大大提高了工作效率，节省了患者就诊时间，降低了劳动强度，节省了人力资源；同时也降低了人为误差，提高了准确度。全自动血细胞分析仪作为医院患者的三大常规检测项目之一的检测设备，更是在医院得到广泛应用[1]。自动全血模式和预稀释模式是全自动血细胞分析仪常用的两种检测模式，为了了解两种模式在迈瑞BC-5600全自动血细胞分析仪上的检测性能，2013年10月我们将血细胞分析仪专用质控物（光学法）用这两种检测模式各进行30次检测，现报道如下。
1 仪器、材料与方法
1.1 仪器及试剂
迈瑞BC-5600全自动血细胞分析仪，中国深圳迈瑞公司产品，该仪器具有自动全血和预稀释模式，全部使用原装配套的稀释液、溶血剂、清洗液、校准品和质控品。
1.2 材料
1.2.1 血细胞分析仪用质控物（光学法）水平中值 3.0mL；型号：BC-SD；P/N：040-00/426-00.LOT.BC309AN.2013-11-05；深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司MINDRAY，BC.5600。
1.2.2 自动全血模式样本 血细胞分析仪用质控物（光学法）水平中值：从冰箱取出，恢复室温，混匀后上机自动检测。
1.2.3 预稀释模式样本 40 μL的血细胞分析仪用质控物和120 μL的稀释液混合均匀，即配成预稀释模式样本。
1.3 方法
1.3.1 检测方法 按仪器操作说明[2]，调整校对好BC-5600全自动血细胞分析仪，在这两种检测模式下对两种模式样本各进行30次检测。
1.3.2 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对两种模式实验数据[白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）的结果]进行处理，结果用均值±标准差（x±s）表示，采用t检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
迈瑞BC-SD血液细胞质控物在BC-5600全自动血细胞分析仪的两种模式各30次的检测结果见表1。对比两种检测模式的结果不难看出自动全血模式下的各项目精密度优于预稀释模式。两种模式白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）差异极为显著，而血小板（PLT）的结果无差异。
3 讨论
血细胞检测作为医院就诊者的常规检测项目，对就诊人员是否存在出血、炎症、感染、贫血和血液系统疾病等提供重要诊疗信息[3-7]。尤其对那些以传染病、肝胆病患者为主的专科性医疗机构，血细胞检测在细菌/病毒感染、脾功能亢进、消化道出血患者的诊疗以及抗病毒药物治疗过程中更加重要[8-10]。
血细胞分析仪自从20世纪50年代，库尔特（Coulter WH）根据血细胞是不良导体的特性，在电解质溶液中悬浮细胞颗粒在通过计数小孔时引起电阻变化，再经仪器放大、甄别、整形、计数，生产出第一台血细胞计数仪后，开创了血细胞计数的新篇章，实现了血细胞计数的自动化。目前，随着科技的不断发展，血细胞计数仪在库尔特原理基础上有了新的飞跃。血细胞计数仪也由半自动到全自动，三分类发展到五分类；仪器的设计更加精密、严谨，功能更加完善，分析方法也不断更新换代。全自动血细胞分析仪BC-5600应用半导体激光流式细胞技术获得白细胞总数和五类白细胞的分类统计计数；血红蛋白浓度采用比色法；红细胞和血小板数目以及体积分布用电阻抗法检测；其余参数由分析仪计算得出。
由表1不难看出，自动全血模式结果的标准差和变异系数较预稀释模式的小，其结果的精准度也就更可靠[11]。自动全血模式的重复性、精密度之所以较预稀释模式的好，是由于自动全血模式的检测全程基本都在封闭的环境中进行，既没有人工操作的参与，也不受外界环境影响，更没有交叉污染的干扰；再加现代仪器的做工精良、考究、严谨，使得仪器在检测过程中的吸样和稀释两步固有误差降低，并可通过质控品和校准品进行校正和修正。而预稀释模式下，从预稀释液的准备及末梢血样本的采集、吸取、混匀到放置后混匀上机检测，整个过程都在外环境中暴露，是开放性的；此过程中，稀释液采集的精准、人工末梢血采集时的污染、采血微量管的偏差、吸取末梢血及混匀操作的差异、还有试剂水分蒸发和空气中颗粒污染等随机误差很难消除，因而对检测结果造成偏差，影响准确性。
从本文可知外周血误差大、重复性差，因此做血细胞分析时尽量按《全国临床检验操作规程》要求采用抗凝静脉血，而少用外周末梢血。并按国际血液学标准化委员会的要求用乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝，且含量为每毫升血液用1.5～2.2 mg抗凝剂[4]。要严格控制血液与抗凝剂的比例，不能过高或过低，否则影响血细胞计数的准确性。对于极个别因使用EDTA-K2抗凝造成血小板偏低者，可换成枸橼酸盐或在EDTA-K2抗凝血中加入肝磷脂[12]。另外，使用抗凝静脉血不仅防止了交叉污染，延长了仪器寿命，还能满足原标本的复检和正确反映患者外周血的实际情况。但BC-5600预稀释模式的稀释样品仅可以计数1次，对超出仪器检测能力或异常的样本仍需要再次采集血液，增加患者的痛苦。 为了确保结果准确、可靠，在使用血液细胞分析仪时应注意如下几点：①工作人员上机前要熟读仪器和试剂说明书，掌握原理并严格按程序操作，并使用原厂配套试剂[4，13]。②用EDTA-K2真空采血管采集静脉血，并立即颠倒混匀；抗凝血采集后在室温中不应超过6 h；如需制作血涂片应在2 h内完成。③检测前必须将样本充分混匀。④标本上机前应仔细检查标本量和有无凝块[6]。⑤对于血细胞分析仪结果异常样本应推片染色显微镜下镜检，当然，对于婴幼儿等特殊患者，可采用末梢血检测，而检测结果需校正后方可发出报告。
总之，自动全血模式检测具有良好的重复性、准确性，优于预稀释模式，建议推广，各级医疗单位可根据实际情况合理选择。
