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天然培养基配制实验_鸡血浆的制备

2019.3.31

天然培养基包括：血清、组织提取液、如鸡血浆，鸡胎汁等。其中血清是一种仍在广泛应用中的天然培养基，市场有产品出售。而血浆应用较少，因此用时多自己制备。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社）

实验方法原理	鸡血浆为最早用于培养的液体，含有纤维蛋白原和一定的营养成分，当与鸡胚胎汁混合后，能发生凝固，构成细胞生长的环境，利于细胞向三维空间生长，缺点是易于液化。因制备血浆后不再做无菌处理，全过程必须在严密无菌条件下进行。
实验材料	雄鸡
试剂、试剂盒	肝素生理盐水酒精
仪器、耗材	手术架棉球注射器离心机
实验步骤	利用生长一年左右体大、健壮的雄鸡，采血压计前一天禁食，多喂水。制备方法如下： 1. 肝素溶液制备配制浓度20 mg/100ml 生理盐水肝素液，9 磅10 分钟高压或滤过灭菌，每小瓶中分装入0.5 ml 贮4 ℃冰箱中备用； 2. 动物准备缚鸡于手术架上，令仰卧，从鸡翅取血；展开鸡翅，拔除翅根局部羽毛，选血管粗大部位，碘酒和酒精棉球消毒； 3. 采血取20 ml 无菌注射器，先吸入肝素液少许，湿润注射器内壁后，用16号针头刺入静脉，吸血10 ml，立即注入离心管中，摇匀； 4. 分离血浆 3000 转/分离心10 分钟后吸出上清血浆，分装入小瓶中，－20 ℃冰箱贮存备用。也可采用从鸡的心脏穿刺取血，方法是从锁骨上窝部进针，直接穿入心脏；取血量大而快，用此法采血亦可。展开