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天然培养基配制实验_鸡胚浸出液的制备

2019.3.31

实验方法原理	鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激细胞生长作用，为早年培养使用的培养用液，现已被合成培养液所代替，但在某些研究中仍有一定应用价值。
实验材料	鸡卵
试剂、试剂盒	酒精碘酒 BSS
仪器、耗材	孵化箱烧杯注射器离心机
实验步骤	1. 孵化选健康受精鸡卵，置入37 ℃温箱孵化；箱内置有水皿，以保持箱内湿度，每日翻动卵一次（180 度）； 2. 处理孵育至9—12 日，取出鸡卵置小烧杯中，令气室端向上，用碘酒和酒精消毒蛋壳； 3. 取胚用消毒剪剪除气室端蛋壳，小心拨开尿囊膜，用弯玻棒或变镊伸到胚体颈下方，轻轻挑起鸡胚置入平皿中； 4. 清理去掉胚眼、血块、尿囊膜等物；用BSS 冲洗鸡胚； 5. 粉碎置入烧杯中用剪刀剪碎胚体后，再用组织研磨器研磨；或放入20—50 ml注射器中（无针头）直接压挤入无菌小烧杯中； 6. 浸出加入等量的Hanks 液，用吸管轻轻吹打均匀，密封后置37 ℃温箱中30 分钟； 7. 分离 3000 转/分，离心30 分钟，无菌取上清分装入小瓶中，－20 ℃保存；用前再离心一次，取上清使用。展开
注意事项	1. 全部操作过程要保持无菌，要剔除尿囊膜和眼睛等，以免对细胞产生不良作用。

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