毛细管电泳色谱仪毛细管概述
毛细管电泳色谱仪毛细管是电泳分离的关键。
一、尺寸:
毛细管尺寸的选择与分离模式和样品有关。自由溶液电泳多选用50或75μm内径的毛细管,分离的有效长度常为40~100cm之间。如进行大颗粒如红细胞分离,则需要内径大于300mμm的毛细管。CGE和CEC的有效长度一般控制在20cm左右。
二、涂层:
毛细管一般不需涂层处理。
分离大分子化合物时,常需要惰性管壁,以抑制吸附。CIEF和CGE分离时,需要涂层毛细管以抑制电渗。在分离中,有时为了加强电渗和改变其方向,也需要涂层毛细管。
三、清洗:
毛细管在使用过程可能被污染,从而影响分析结果。为使测定具有良好的重现性,毛细管在使用时应经常清洗。
1、空管通常用0.l~1mol/L NaOH、水和缓冲液顺序冲洗,各洗5~10min,或增加有机溶剂如甲醇清洗步骤,以除去管中的脂溶性吸附组分。如果管内壁吸附有蛋白质和其它有机分子,可用0.l~1mol/L的HNO3洗 5~10min,然后按常规清洗。
2、两次分析之间可用运行缓冲液清洗和平衡。
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