两法检测海岛地区幼儿抗-HBs的比较
目前，常规检测抗-HBs，主要是酶联免疫法（ELISA），尤其近来电化学发光法（ECLIA）以其敏感、自动化程度高、重现性好、快速、稳定等优点，在固相标记免疫测定技术上居领先地位［1］。有文献报道［2］乙肝病毒感染主要发生在婴幼儿时期，为此检测幼儿抗—HBs有重要的意义。因我县地处海岛，有独特的地理环境，所以用先进的ECLIA法测定我县155例幼儿抗-HBs水平，并用ECLIA法作对照，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 检测对象 155例幼儿，男89例，女66例；年龄2~6岁。来自我县各幼儿园，这些对象都按“0、1、6”程序进行过乙肝疫苗接种。
1.2 ELISA试剂 由珠海亚利生物公司提供，用Bio-550酶标仪、兰勃Ⅱ型洗板机。
1.3 ECLIA法 用瑞士罗氏公司ELECSYS 1010电化学发光仪及其相应各种配套试剂。
1.4 质量控制 ECLIA法测定时，用罗氏低、高定值质控品，批号162631，定值为3.07 u/L、86.9 u/L。ELISA法用卫生部临检中心质控品，浓度为30 mu/L，批号030231，质控测定结果都在标定值的允许误差范围之内。
1.5 方法 这些幼儿采用早晨空腹抽血3 ml，分离血清，立即用两法进行抗-HBs测定，另外每人还做HBsAg、ALT两个项目。
2 结果和讨论
2.1 两法抗体阳性率 155例幼儿（男89例、女66例），按ECLIA法以≥10 u/L为阳性，ELISA法以S/CO≥1.0为阳性，结果见表1。表1 ECLIA和ELISA法测定抗-HBs结果表1显示，ECLIA抗-HBs阳性为128例（男74例、女54例），阳性率为82.6%，而ELISA阳性为95例（男55例，女40例），阳性率为61.3%，经χ2检验，χ2=17.4，P＜0.01，两法阳性率差异有非常显著性，ELISA法阳性率和2001年我市疾病控制中心用ELISA法对我县123例城乡儿童乙肝抗体调查的阳性率（60.6%）接近，但两法明显低于文献报道阳性率90%以上［3，4］。
2.2 两法结果比较 95例抗-HBs ELISA法阳性的标本，用ECLIA检测全部呈阳性，而128例ECLIA法阳性的标本，用ELISA法检测阳性仅为95例，说明有32例ECLIA法阳性而ELISA法测定呈阴性，也表明两法的特异性是相符的，但ELISA法的灵敏度明显低于ECLIA法，32例ELISA法阴性的标本，用ECLIA法测定显示抗-HBs浓度都在10~44 u/L，说明ECLIA法有较高的敏感性。
2.3 线性比较 将抗-HBs测定值1000~1400 u/L范围内的3份血清混合，重复测定3次，取其均值作为原倍血清的理论值，然后做6点倍比稀释，求两者相关性并进行回归分析。ECLIA回归方程：Y=1.034X+0.765,R=0.9995，ELISA回归方程：Y=1.081X+1.672,R=0.9964，ECLIA在2~1000 u/L范围内线性良好，ELISA在44~800 u/L范围内线性良好，可见ECLIA检测范围比ELISA宽。
2.4 灵敏度比较 用罗氏高值质控血清86.9 u/L，进行一系列的倍比稀释，结果ECLIA法可以测到2.4 u/L，而ELISA法在43.8 u/L以下S/CO都≤1.0，说明只能测到43.8 u/L，两者灵敏度相差18.3倍。2.5 重现性试验 采取批内和批间差异来确定，用上述两法对低（71.4 u/L）、中（213.2 u/L）、高（532.7 u/L）混合血清，批内试验平行测定20次，批间试验每天上、下午各测定一次，连续10天，结果ECLIA法批内CV分别为4.1%、3.3%、2.6%，而ELISA法分别为6.4%、5.6%、4.3%。ECLIA法批间CV分别为5.9%、4.8%、4.6%，ELISA法批间CV为10.1%、7.3%、6.8%。
试验结果表明ECLIA法检测抗-HBs阳性率明显高于ELISA法。文献［2］认为抵抗HBV感染的最低抗-HBs有效水平为10 u/L，因此那些抗-HBs浓度在10~46 u/L的幼儿其实不用立刻进行乙肝疫苗加强接种。由此可见，用ECLIA法测定抗-HBs具有十分重要的意义。
总之，抗-HBs定量测定对乙肝的治疗和防治有重要的参考价值，尤其ECLIA法测定抗-HBs不但重现性好、自动化程度高、简便快速，而且灵敏度极高［3，4］。因此，ECLIA法测定抗-HBs目前是一个比较理想的方法。
［参考文献］
1 李倩，高学慧，甘勇，等.电化学发光与酶联免疫检测血清甲胎蛋白的比较.中华检验医学杂志，2001，24（4）：243.
2 郭弘红，董春明，王文庆，等.重组酵母乙肝疫苗源性，免疫持久性及保护效果.中国计划免疫，1999，5（3）：158.
3 崔清荣，葛君华，陈达乾，等.天台县1992~2000年儿童乙肝疫苗免疫后抗体检测.浙江预防医学，2002，14（10）：16.
4 徐慧文，李东升，徐经武，等.国产血源性评价.中华流行病学杂志，1992，12（6）：362-364.
作者单位： 202450 浙江嵊泗，嵊泗县人民医院
