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光合细菌培养基优化

2021.5.19

  光合细菌(PSB)是地球上最早出现的原核生物,具有原始不产氧的光能合成体系,它的生态学研究始于十九世纪中叶,100多年来取得了许多成果。 在营养中以碳、氮、磷营养因素为主的基础培养基,使光合细菌具备生命活动的能源和建造有机体的物质基础。还需要一定量的镁、钙、钠及有关微量元素,以保证其生理代谢的正常进行。

  1常用培养基

  配方1:NH4 C1 1.Og,CH3 COONa 3.5g,MgC1 2 0.1g,CaC12 0.1g,KH2 PO4 0.6g,K2 HPO4 0.4g,酵母膏 0.1g,水 1000mI ,pH7.2.

  固体培养基,由在液体培养基中加入2% 的琼脂制成.

  2生产条件

  1、 培养介质:含菌量较低的清洁淡水。地下水(井水)含菌量低,为最佳水源;清洁的地表水(河水)也可

  使用;含氯量较高的自来水应敞口放置一天;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本太高。 选取水源时,最好先做几种方便取用的水源的对比试验,使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好),就选用哪里的水作为生产用水。

  2、酸碱度:PH值在7.5-8.5为最好,光合细菌的适应PH范围在6-10之间。

  3、温度:以30-34℃为最适生长温度,其适应的生长温度范围为18-45℃,实际操作越接近最适温度范围越好。

  本公司产品配方中含有抑制高温季节绿硫菌的产生,所以不惧高温,也不会大量产生绿硫菌。

  4、光照强度:以3000-4000勒克斯(LX)为最佳,即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯炮作光

  源,而太阳光照为最好且不要成本。

  5、透气性:密闭、敞口皆可培养,密闭但是留十分之一空气效果更好。

  6、工具:筒状塑料农膜或透明玻璃池、敞口塑料容器(400升)、两头能接管的最小型自吸泵或水舀子、白帜灯炮、温度计

  3生产方法

  (以生产1吨光合细菌菌液为例)

  培养容器

  1、两端开口的长筒状透明塑料农膜,尽量选择厚一点的不破,尽量选择幅度宽一点的,剪成10米长一个备用

  2、透明玻璃连接而成的池子,类似于金鱼池,但是要做薄(30厘米厚)以方便两边采光

  生产过程

  1、第一次培养,可以得到220公斤菌种

  (1)在阳光充足的上午10点左右,先将准备用水160公斤(有条件可以先将水加温到30度,这样培养的速度更快,菌液质量更好。注意温度不可过高破坏菌种)加入到敞口塑料容器(400升)内,再加入培养基二袋,建议先用小容器少量水溶解培养基搅拌,慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全,最后接种菌种60公斤搅拌均匀,可以按照上述比例相应增加批次量。

  (2)选择采光充足,地面平坦的地方(可以垫上编织袋及其它东西,以防地面温度太低),将上述混合培养液灌入或用自吸泵直接抽入透明塑料农膜内,尽量排尽空气,可以有少量小气泡,两端系紧。

  (3)玻璃池子可以直接配培养基和接种菌种,需搅拌均匀。

  (4)室外温度适宜情况下(30-34℃),将菌液直接置于阳光充足的地方培养。温度过低(气温低于25度),可用透明塑料薄膜搭建温棚,采光增温,仍达不到要求,应采取其它增温措施;温度过高(气温高于40度),将菌液置于通风的地方,仍过高,应在桶周围洒水降温,或采取部分遮阳(用黑色的遮阳塑料网)。

  (5)为了光合细菌更快繁殖,如方便请白天每隔3小时人工摇动菌液一次,此方法是为了使下沉菌种上浮,更好接触培养基加快繁殖,如不方便也可以不用,只是繁殖相对较慢。

  (6)本公司菌种红螺菌特别对温度要求很高,喜高温,只要温度达到(34度以上),即使有微弱光均可快速生长。所以有条件特别是气温较低时尽量将水温加热到30度。

  (7)如连续晴天或气温较高的阴天,3-4天后可培养成熟;若有下雨天或气温较低阴天,培养时间则相对延长;连续有下雨天或气温较低阴天,应采用60瓦的白帜灯炮悬于农膜上方10厘米,每隔30厘米间距一个连续光照,缩短培养时间;也可以采用白天晒太阳,晚上用白帜灯泡补光,缩短培养时间。

  2、第二次培养,可以生产1000公斤菌液

  (1)在阳光充足的上午10点左右,先将准备用水800公斤(有条件可以先将水加温到30度,这样培养的速度更快,菌液质量更好,注意温度不可过高破坏菌种)加入到敞口塑料容器内,再加入培养基八袋,建议先用小容器少量水溶解培养基搅拌,慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全,最后接种第一次培养成功的220公斤菌种搅拌均匀。若配比容器较小,可以按照上述比例相应减小批次量。

  (2)-(7)见第一次培养方法

  3、注意事项

  (1)尽量选择在阳光充足的上午10点开始,因为培养繁殖初期8小时对温度和阳光要求最高,是关键阶段。

  (2)对水温要求较高,特别第一次培养200公斤菌种尽量采用人工加热,第二次培养数量较大,有条件可以加热,没有条件可以提前一天准备用阳光晒热。可以采用加热少量水高温再兑至30度。

  4、培养过程中菌液可能出现的问题及对策

  变淡

  原因:接种量过少,菌种老化、杂菌过多,PH值过低或过高,光照不足,温度过低或过高,水的硬度过高。

  对策:调节至正常状态。

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