旋光度测定方法的概念及注意事项
一、概述
平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转,旋转的度数称为旋光度。在一定波长与温度下,偏振光透过长1dm、每1ml中含有旋光性物质1g的溶液,测得的旋光度称为比旋度。比旋度为物质的物理常数,可用于鉴别或检查某些物质的光学活性和纯杂程度。旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系,可用于含量测定。除另有规定外,本法系用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,测定管长度为1dm(如使用其他管长,应进行换算),测定温度为20℃。
二、仪器
圆盘式旋光仪由光源、起偏镜、测定管、检偏镜、半影板调零装置和支架组成。
起偏镜是一组可以产生平面偏振光的晶体,用天然晶体如方解石按一定方法切割再用树胶黏合而制成。现今则采用在塑料膜上涂上某些具有光学活性的物质,使其产生偏振光。圆盘式旋光仪测量误差较大,精度为0.05°,20世纪80年代,数显自动指示旋光仪和投影自动指示旋光仪相继出现,仪器的精度也提高到了0.01°和0.005°,《中国药典》规定应使用精度至少达到0.01°并经过检定的旋光仪。
三、测定方法
1.比旋度的测定先将测定管用供试品溶液冲洗数次,缓缓注入供试品溶液适量(注意勿使产生气泡),置于旋光计内检测读数,即得供试品溶液的旋光度。使偏振光向右旋转者(顺时针方向)为右旋,以“+“符号表示;使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左旋“—”符号表示。同法读取旋光度3次,取3次的平均数,按照式(1)和式(2)于于计算,即得供试品的比旋度。
对液体供试品
式(1)
对固体供试品
式(2)
式中,为比旋度;D为钠光谱的D线;t测定时的温度;l为测定管长度(dm);α为测得的旋光度
;d为液体的相对密度;c为每10ml溶液中含有被测物质的质量(按干燥品或无水物计算),单位为g/100ml。
2.物质含量的测定对已知比旋度的物质可测定旋光度,计算浓度,进而测定含量。按照式
(3)计算。
C=式(3)
式中各符号的表示及意义同上。
3.结果判定将测定结果与规定的比旋度比较,如果测定结果在规定的范围内,判为符合规定;否则,判为不符合规定。
四、注意事项
1.物质比旋度与测定光源,测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。因此表示物质出发度应测定条件。
2.测定前应以溶剂做空白校正,测定后再校正次以确定在测定时零点有无变
动如2次正发现零点有变动,则应重新测定旋光度。
3.供式品溶液应充分溶解、澄清。配制供试品溶液以及测定时,应调节温度至
或品种项下规定的温度。供试品溶液与空白溶剂应使用同一测定管,并保定管方向位置一致
4.规定或根据读数精度配制浓度适当的供试品溶液,通常要求读数误差小于±1.0%。如供试品溶解度较小,应尽量使用2dm的长测定管,以减小测定误差。对于易发生消旋或变旋的供试品,配制溶液后应及时测定。
