用UPLC/MS/MS和UPLC/PDA 进行三聚氰胺、三聚氰酸二酰...（三）
第 2 部分： UPLC/PDA 分析
图 7 给出了使用 PDA 检测型 ACQUITY UPLC 分离三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的加标型宠物食品的典型过程，该分离过程需时不到 1.5 分钟。该分离使用相同的 ACQUITY BEH HILIC 2.1 x 100 mm 色谱柱，所用的流动相构成也与串联四极杆质谱法相同。结果表明这两种化合物的校准曲线在 1-25 ppm 的范围内呈线性。
三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的色谱峰可根据保留时间而轻松鉴定，并可通过积分进行定量分析。在图 7 中， 1 分钟处的未知峰在 221 nm 下出现λ最大值。检测三聚氰酸二酰胺的纯标准品时，观察到一个具有相近保留时间和λ最大值的色谱峰；因此认定其为三聚氰酸二酰胺的一种杂质。紧邻三聚氰酸二酰胺峰的第二个未知峰在 236 nm 下出现λ最大值，与未加标型狗粮的色谱峰相近。
除了保留时间的完全匹配之外，通过使用 PDA 和 Empower™ 软件的 UV 光谱库功能，也能提高成分鉴别的可信度。图 8 和图 9 分别给出了 10 ppm 三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺标准品以及 10 ppm 三聚氰酸标准品的光谱指数图。图 10 给出了一幅用以确认三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺加标型宠物食物样品的光谱匹配情况的光谱指数图
结论
ACQUITY UPLC - 台顶式串联四极杆质谱仪（ TQD ）可提供更高的灵敏度和质量特异度，从而可用不到 2 分钟的时间定量检出 ppb 水平的三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺。使用次要的 MRM 离子跃迁可对加标型狗粮中是否存在三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺进行确认。由于存在形成三聚氰胺 - 三聚氰酸结晶体的风险，因此三聚氰酸在另一次色谱检测中进行分析。
当不需要较高的灵敏度和质量特异度时， ACQUITY UPLC PDA 检测可作为 UPLC/MS/MS 的一种快速而划算的替代方法。快速分析三聚氰胺及其代谢物的能力可简化与质控或产品合规相关的工作流程。
参考文献
1. 《华盛顿邮报》的网址： http://www.washingtonpost.com/wp-dyn/content/article/ 2007/05/06 /AR2007050601034.html
2. FDA 的网址： http://www.fda.gov/oc/opacom/hottopics/petfood.html
3. 在线文章： http://www.flworkshop.com/ ，“用 LC-MS/MS 测定组织中的三聚氰胺和三聚氰酸的简化方法”，由 FDA 方法开发分部的 Alexander J. Krynitsky 撰写
