外周血单个核细胞分离实验的操作步骤
1、取外周静脉血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混匀。
2、将分层液加入试管中,用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。
3、置于水平离心机离心,1500r/min,10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面,呈白膜状。
4、用尖吸管吸取界面的细胞层,置于另一试管中,加入适量的Hank's液,混匀后以1000r/min,离心10min,弃上清。
5、同法洗涤细胞2次。
6、将细胞重悬于RPMI-1640培养液中,4℃保存备用。
推荐