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关于玉米原生质体的提取方法

2019.7.12

一、酶解液的组成:

1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8

二、漂洗液的组成:山梨醇14%,硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5 mmol•L-1,硫酸铜0.01 µmol•L-1

三、材料预处理: 取黄化叶片,去中脉后放入25%的蔗糖溶液中处理15~20min,使其发生质壁分离,然后用于酶解

四、进行两次酶解 在第二次酶解结束后,将叶片取出放于漂洗液中漂洗抖动使原生质体释放出来,然后将漂洗液在 1500 rpm离心 5 min,沉淀即为原生质体,实验证明在离心力为2500rpm,时间5min时,原生质体得到率最高。


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