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PEG介导的原生质体转化

2022.11.18

PEG介导的原生质体转化法是通过PEG的介导作用将遗传因子转入受体细胞原生质体中的一种方法,原生质体的制备与再生是转化的关键,此外CaCl2也是不可或缺的成分。

目前,多数丝状真菌的转化以原生质体作为感受态细胞,在一定浓度的CaCl2和PEG等条件下和需转化的外源DNA混合完成的。因此,PEG介导的原生质体转化法包括原生质体的制备和原生质体转化两个主要过程。

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PEG介导法

为我国学者高国楠首创,是借助化合物PEG、磷酸钙及高pH条件下诱导原生质体提取外源DNA分子。PEG是细胞融合剂,可通过引起细胞膜表面电荷的紊乱,干扰细胞间的识别,从而有利于细胞间融合和外源DNA分子进入原生质体。碳酸钙可与DNA结合形成DNA-碳酸钙复合物而被原生质体摄入。


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