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如何解决大鼠尾静脉注射比小鼠还难的问题?

2021.3.08

其实大鼠尾静脉注射步骤和小鼠基本类似,只是......
 

因为大鼠,
个体更大,难固定、易挣扎;
尾巴颜色深,不易辨别血管;
尾巴质地更粗糙,扎针力度要更大;
 

因此大鼠尾静脉注射操作难度更大。
如下图分别为小鼠和大鼠的尾巴,可见大鼠尾巴的质地粗糙,难辨别血管的特点:
 

小鼠尾巴(左)和大鼠尾巴(右)
 

 大鼠尾静脉注射过程

一、准备工作

大鼠固定器,1ml注射器,酒精棉球,医用胶带,加热装置等。

二、找准尾静脉,并扩张血管

大鼠尾静脉到底是哪条?大鼠尾静脉组成与小鼠类似,由于两外侧静脉血管,最明显,因此注射一般选择位于尾巴两侧的血管,注意是显青色那条,腹部方向偏红色的血管是动脉。

扩张静脉血管(3种途径)

1.鉴于尾静脉细小并且不明显,所以在注射之前需要将血管扩张,便于注射。
2.将大鼠尾部在45~50℃左右温水浸浴2-3min,以扩张静脉,软化角质;
3.用酒精擦拭血管,可使血管扩张,使静脉血管相对清晰一点,同时也可软化表皮角质;
4.利用红外线烤灯加热鼠尾3-5min,使静脉充盈。

三、大鼠固定

由于大鼠体积较大,尾静脉注射时,必须使动物处于相对稳定状态才可操作。
一般是使用大鼠固定器:使动物整个身体置于固定器中,尾巴从固定器孔中露出来,固定器前端是镂空的小孔,保障动物呼吸顺畅;并且前端可调节,根据动物大小适当调节达到最合适的部位。
 

大鼠固定器

注:为了注射方便,可以使动物处于侧躺,血管正面向上
 

 四、注射(最关键最困难部分)

1.左手捋顺固定尾巴找到尾静脉,在尾尖向尾根方向3-5cm(距尾尖1/3~1/2段)处酒精擦拭消毒;
2.用1ml注射器穿刺尾静脉,针尖斜面朝上,针头与鼠尾保持15-30°的夹角刺入,针尖刺破表皮后,平行进针;
3.接着继续向尾根部方向进针大约1cm停止前进,稍微回抽,注射器看到有回血比较顺畅的流出时即可开始慢慢推注;
4.注射结束拔出注射器,医用胶带绑上伤口,防止出血。

具体操作如下图所示:
 


 

具体操作步骤,请参考下面视频:

常见问题分析

1. 大鼠尾静脉注射成功的关键点?

1)提前加热动物尾巴,使静脉血管看起来有明显的扩张,易辨别;
2)切记分清尾巴上的静脉位置,动物正常站立情况下,尾巴左右两侧才是静脉;
3)穿刺时一定要准确刺中静脉血管,不能横向刺进太多,以免刺穿血管不回血,再注射容易出现鼓包。
4)注射时的速度应慢慢推进,推注太快容易使动物感到不适,会出现挣扎,容易出现意外状况。

2. 注射成功的特点?
 


1)进针时,针头可见回血(如上图),代表注射到静脉。
2)注射到静脉,推液几乎没有阻力。
3)随着药液推进,能清晰看到液体在血管流动。
4)药物注射结束后,尾巴没有明显的肿胀及药物溢出。

3. 注射失败的特点?

1)如果注射到静脉以外,强行推液,阻力较大;
2)没有回血注射时,液体无法进入静脉而集聚在注射部位,从而导致血管部位肿胀变白;
3)药物注射出针后,对于有大量血或者药液大量渗出,则进入体内药量无法保障;
4)尾部注射部位会有少量淤血,尾巴颜色变暗并肿胀。

4. 注射位置的选择?

一般选择距尾尖1/3处注射,有2个原因;一是因为随着往根部走,大鼠尾巴的角质层增厚,尾静脉不再那么浅显;二是若是失败,同一部位不宜再次注射可以逐步向尾根移动。若是技术很娴熟,也可以根据自己经验选择注射位置,因为每个位置的注射力度不同的,需要自己体会。

5. 如何防止刺入皮下?

很多时候你觉得进了血管打的却是皮下,这与进针的位置和深度有很大关系。注射时既不能偏离血管刺入,也不能刺入太深,这样容易刺穿血管。刺入血管的手感是稍微不同于刺入表皮的,刺入后看看针头是否随尾巴向根部方向与血管平行着移动;另外需要进针深一些,最好是进入到没过针头总长的三分之二,这样注射器针头就平稳的在血管里面了。

6. 尾静脉注射对大鼠周龄的要求?

大鼠随着年龄的增长,体重增加,体型增大,同时尾巴皮肤的角质层也开始增厚。尾巴慢慢的由清晰可见血管脉络的浅色变成颜色发黄发暗的黄褐色形成厚厚的角质层,静脉血管脉络也不清晰可见了。如下图为老年鼠的尾巴:
 

老年大鼠尾巴
 

 一般大鼠在6-8周时,相对于年纪更大的大鼠来说尾巴是比较清晰的,也比较容易静脉注射。但对于10周以上的老年鼠,不建议尾静脉注射,可以考虑其他给药方式开展实验。

7. 大鼠尾静脉注射常用于什么实验?

常用于药代动力学实验,急性毒性实验,也可用于注射细胞病毒等。


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