人肝癌细胞 PLC/PRF/5细胞培养中常见的问题:微生物污染
人肝癌细胞PLC/PRF/5细胞培养中常见的问题:微生物污染
1,细菌和霉菌污染,等到培养基变浑浊就迟了。
2,当微生物污染较轻时,微生物和细胞可以共生长,细胞仍然长势较好。
3,防止细胞的微生物污染,要做好消毒灭菌,包括培养箱的消毒灭菌,不能抱有侥幸心理。
4,及时换液,保持培养液的相对干净状态,就不易让微生物滋生。
5,及时冻存没问题的细胞,是防止细胞微生物污染的第二保障。
6,倒置显微镜下可以发现的微生物污染,主要是形态异常十分明显的微生物污染,比如链球菌和念珠菌的一串串、细胞之间背景的泥沙样改变,应注意与生长状态欠佳的细胞及细胞碎片鉴别。若倒置显微镜下没发现明显微生物污染,但存在可疑,只能通过特异的检测手段来排除。
7,常规用双抗预防,但是双抗不能抗支原体、衣原体、病毒等微生物,只能抗大多数细菌(青霉素主要抗革兰氏阳性菌,而链霉素能抗阴性菌),这是其局限性。况且抗生素对细胞也是有影响的,在做药理实验时连抗生素也不要加。必要时用到支原体清除剂等产品进行细胞的抢救。
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