清门冬氨酸氨基转移酶AST测定实验
实验方法原理 | AST 催化门冬氨酸与α-酮戊二酸的氨基转换反应,生成草酰乙酸和谷氨酸。 L-门冬氨酸十α酮戊二酸 = 草酸乙酸十L-谷氨酸 经 60min反应后,加入2,4 二硝基苯肼终止反应,并与反应液中的二种α-酮酸生成相应的2,4二硝基苯腙,在碱性条件下,两种苯腙的吸收光谱曲线有差别,在500-520nm处差异最大,草酸乙酸所生成的苯腙的显色强度显著大于α-酮戊二酸本腙,据此可用比色法测定AST活力。 |
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实验步骤 | 一、 实验试剂: |
注意事项 | l. 本法的缺点是标本AST活性高时草酰乙酸对AST现实反锁抑制,使测定结果偏低,酮血症中乙酰乙酸及β-羟基丁酸,因没对照管不会引起测定结果假性偏高。 |