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核糖核酸酶H的基本豪华版介绍

2022.8.22

  核糖核酸酶H(RNase H)最早是从小牛胸腺组织中发现的,其编码基因已被克隆到大肠杆菌中。它能特异地降解DNA:RNA杂交双链中的RNA链,产生具有3’一OH和5’一磷酸末端的寡核苷酸和单核苷酸,它不能降解单链或双链的DNA或RNA。

  在分子克隆中,核糖核酸酶H的主要用途是与大肠杆菌DNA聚合酶工和DNA连接酶一起参加cDNA克隆中第二条I)NA互补链的合成。当用逆转录酶以mRNA为模板合成cDNA第一链之后,用RNase H部分消化mRNA:DNA杂交分子中的RNA,产生的RNA片段就像冈崎片段一样,作为大肠杆菌DNA聚合酶T的引物,以cDNA第一链为模板合成DNA,直到把mRNA全部代替。然后在DNA连接酶的作用下,封闭缺口形成双链cDNA。

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