关于基因转移转染细胞的处理方法介绍
①如果不进行其它处理（如用氯喹、甘油或丁酸钠等试剂处理，见后），可在细胞培养16～24h后，吸出培养液和沉淀物，用PBS将单层细胞再洗一次。然后按下述③d操作。
②在许多情况下，同时用氯喹处理细胞，可提高DNA摄入率。氯喹可能是通过抑制溶酶体水解酶类对DNA的降解而起作用的。氯喹浓度及其处理时间不能超越细胞对其毒性作用的耐受能力。因此必须通过预实验来决定适于所用特定型别细胞的最佳氯喹浓度。但对于大部分型别的细胞，用终浓度为100μmol/L的氯喹处理3～5h，都可取得良好效果。可在磷酸钙-DNA共沉淀物加入细胞之前或之后（见步骤（4）介绍的其它方法），直接将氯喹二磷酸贮存液（过滤除菌并贮于-20℃用金属泊密封的管中，100mmol/L）稀释（1：100）于培养液中。在氯喹处理过程中，细胞呈现泡状是正常的。经用DNA和氯喹处理3～5h后，弃去培养液和沉淀，用PBS洗，然后按下述d操作。
③用甘油短暂处理细胞，同样可提高转化效率或导入DNA的瞬时表达水平。这一步骤可以在氯喹处理之后进行。由于不同细胞对甘油的毒性作用的敏感性相差悬殊，因此每种型别的细胞都必须通过预实验决定最佳处理时间（从30s至3min）。耐受甘油的细胞可以暴露于含磷酸钙-DNA共沉淀物（含或不含氯喹）的生长液3～5h后进行休克。
a. 吸出生长液，用PBS将单层细胞洗1次
b.在单层细胞中加入1.5ml溶于1×HBS的15%甘油，在37℃培养0.5～3min
c.吸出甘油，用PBS将单层细胞洗1次
d.加入5ml预加温的完全生长液，放入培养箱中继续培养24～60h后，检测DNA的瞬时表达或将细胞重新种入适当的选择性培养基中，分离稳定的转化体。
④业以表明，丁酸钠也可以在猴源和人源细胞中增强带SV40早期启动子/增强子的重组质粒的表达。可直接在生长液中加入有关试剂，也可以使经过甘油休克的细胞接受丁酸钠处理。须视细胞型别的不同，采用不同浓度的丁酸钠（500mmol/L贮存液，在化学通风橱中用NaOH中和丁酸制备而成），例如：
CV-1
10mmol/L
NIH-3T3
7mmol/L
HelaS3
5mmol/L
CHO
2mmol/L
不加完全生长液，然后重复步骤d。
