生物化学检验技术基础知识(二)常用玻璃器皿的使用
生物化学检验实验大多都是定量分析，其检测结果是否准确，与实验所使用的玻璃器皿是否清洁，能否正确使用不同规格的玻璃量器有直接关系。因此，学习和了解有关玻璃器皿的正确使用和清洁等方面的知识是非常必要的。
一、常用玻璃器皿的规格和使用
生物化学检验实验室常用的玻璃器皿分两大类，一类作为容器用的玻璃器皿如试管、烧杯、试剂瓶等；一类为用于计量液体体积者称计量玻璃量器厂如量筒、量杯、移液管等。其体积计量单位为毫升；因其计量的检定条件是以20℃为标准，故在量器上标示出m1、20℃的字样。
（一）刻度吸管
刻度吸管是生物化学检验实验室使用较多的一类定量移取溶液的玻璃量器。其规格有0．1、0．2、0．5、1、2、5、l0ml等数种。根据是否需吹出管尖不能自然流出的液体，将刻度吸管分成完全流出式和不完全流出式两种类型。所谓完全流出式是以溶液注入吸管的总体积计量的，使用这类吸管时，需将残留在吸管尖端不能自然流出的液体吹出，通常在这类吸管的上部管壁上标有“吹”和“TC'’字样；不完全流出式吸管体积的计量不包括管尖最后不能自然流出的液体，使用这类吸管时，不能将残留在管尖的液体吹出，该类吸管上部管壁常标有字母“TD'’字样。
使用刻度吸管时，将管尖插入液面下约1cm处，吸管上的刻度面向操作者，用橡皮球吸取液体至所需量标线上稍多点，速用食指堵住管口，吸管移至液面上，垂直吸管，轻轻放松食指，将多余溶液徐徐放回试剂瓶中，待吸管内液体弯月面之最低点恰好与所需量之标线相切，用食指压紧管口，让管尖在瓶壁上轻触并稍停，待吸管外壁上粘附的液体流人瓶内，再将吸管移至容器内，松开食指，让吸管内液体自然流出即可。
吸管的规格较多，根据不同的移液体积，正确选用适宜规格的吸管是很重要的，如用10ml的吸管吸取0．1ml溶液或取液1．0ml用0．5ml吸管吸取两次等，这种不正确选用吸管的移液方法，均会人为导致分析误差增大，致实验结果不准确。
此外，吸管的不同区段其准确性亦不一样，一般吸管的下部计量准确性较其中上部差，故应尽量避开使用吸管的下部。如吸取0．6ml溶液，可选用1．0ml吸管，吸液至1．0ml处，放溶液至0．4ml处，收取所放溶液即为所需溶液，剩余0．4ml溶液弃去。
（二）量筒、量杯：
量筒呈圆柱形，分有嘴和无嘴具塞两种类型。量杯呈圆锥形，带倾液嘴。量筒和量杯常用于量取体积要求不太精确的液体。其容量允许误差大致与其最小分度值相当。量筒的精确度高于量杯。规格有5、10、25、50、100、250I、500、1000、2000ml等数种。
用量筒或量杯量取溶液体积时，试剂瓶靠在量筒口上，试剂沿筒壁缓缓倒人至所需刻度后，逐渐竖起瓶子，以免液滴沿瓶子外壁流下，反之从量筒或量杯中倒出液体时亦如上操作。
（三）容量瓶：
容量瓶简称量瓶，为一平底圆球状长颈瓶，瓶颈上刻有一环线刻度表示容量，具磨口瓶塞，属一种较准确的容量量器，常用作制备一定体积的标准溶液和定容实验用。量瓶颜色分棕色和五色透明两种，前者用于制备需避光的溶液，其规格有5、10、25、50、100、200；250、500、1 000、2 000ml等数种。
使用量瓶配制溶液时，一般是先将固(液)体物质在洁净小烧杯中用少量溶剂溶解，然后将溶液沿玻棒转移到量瓶中，烧杯用少量溶剂冲洗2~3次，一并倒人量瓶中，再一边加溶剂并不时摇动量瓶使溶液均匀稀释。这样可避免混合后体积发生变化。当稀释至液面接近标线时，应等待30秒~1分钟，待附着在量瓶颈上部内壁的液体流下，并消失液面气泡后，再小心逐滴加入溶剂至液面的弯月面最低点恰好与标线相切。将量瓶反复倒转摇动，至溶液充分混匀即可。
注意，量瓶与其磨口玻塞是密闭配套的，玻塞不能混用，以防量瓶倒转混匀时液体流出。玻璃量瓶不能用来贮存强碱溶液(强碱溶液能严重腐蚀玻璃)。洁净后的量瓶不能用直接火烤或烘箱中高温烘烤的办法使其干燥，否则玻璃受高热致其容积发生改变。
（四）微量加液器：
微量加液器又称微量移液器，分固定式和可调式两种类型，固定式指一支加液器只能移取一种规定容量的液体，因其可变因素少，常用于标准液和标本的移取；可调式加液器，指一支加液器移取的体积可根据需要调整，即可一器多用。因微量加液器使用方便，体积较准确，现已广泛应用于临床生物化学检验实验室。微量加液器的规格在lml~10ul之间不等，可根据不同的需要选用。现已有5ml~1m1规格的加液器，可取代玻璃吸管，以提高准确度。
1．原理 当按压加液器手柄时，加液器内活塞在活塞腔内作定程运动，排出活塞腔内一定体积空气，松开按压力后，利用活塞在弹簧压缩力作用下复位时产生的负压，吸人一定量体积的液体。
2．使用方法 将塑料吸液嘴套在加液器的下端，轻轻旋动，以保证密封，如为可调式加液器，应将其调节到所需吸取体积标示处。在正式吸液前，应将加液器吸排空气几次，以保证活塞腔内外气压一致。将加液器手柄按压到第一停止点，并把吸液嘴浸入液面下2mm~3mm，再缓慢地松开压力，使之复位，待1~2秒后，取出加液器，将加液器移至容器底部，缓慢按压手柄至第一停点，待1~2秒后；再将手柄按压至第二停点，以排尽吸液嘴内全部液体，取出加液器，放松手柄，使之复位，此即为一次操作全过程。
二、常用玻璃器皿的清洗方法
(一)常用洗涤液和它们的使用方法
1．合成洗涤剂
市售的合成洗涤剂如洗衣粉、餐具洗洁剂等均可用于清洁玻璃器皿。其特点是价格低廉，使用方便，去油污力强。使用时配制成1％~2％的水溶液，将待清洁之玻璃器皿浸泡在洗涤剂溶液中，用毛刷刷洗即可。值得注意的是，因残留洗涤剂往往对实验结果影响较大，故此类洗涤剂洗过的器皿必须用自来水反复冲洗干净。
2．重铬酸钾洗液
利用重铬酸钾在强酸溶液中的强氧化性去除污物。其配制方法为：称取重铬酸钾50g加蒸馏水50ml溶解后，将500ml浓硫酸缓缓加入上液中(切忌不可将重铬酸钾溶液倾人浓硫酸中)，边加边用玻棒小心搅拌，配好放冷，装瓶加塞备用(防止浓硫酸吸水降低去污能力)。新配制的洗液为红褐色，去污力强，当反复使用多次后，变为深绿色，即表明洗液已无氧化洗涤能力。铬酸洗液去污效果好，但缺点是六价铬污染水质。除其它洗涤剂不易洗净的器皿外，尽可能避免使用铬酸洗液。需强调的是：玻璃器材放人洗液前应干燥。因为带水器材放人洗液易使溶液变绿失效。
3．30％硝酸溶液
适用于可氧化污物的去除，如C02测定仪、微量滴管和比色皿的洗涤。
4．45％尿素溶液
适用于洗涤附有蛋白质污物的器皿。
5．乙二胺四乙酸二钠（EDTANa2)洗液
使用时配成浓度5％~10％的溶液，利用其络合金属离子的能力，加热煮沸可清洁玻璃器皿附着的一些重金属离子和钙镁盐类化合物。
(二)洗涤方法
洗涤就是利用物理和化学的方法，除去附着在玻璃器皿上的污物，达到清洁器皿的目的。
1．新购置玻璃器皿的清洗
新购置的玻璃器皿都附有游离碱，应先置2％盐酸溶液中浸泡2~6小时，以除去游离碱。取出用自来水冲洗后，置2％合成洗涤剂溶液中，用毛刷刷洗，以除去油污。取出再用自来水反复冲洗，最后，用蒸馏水淋洗2~3次即可。
2．使用过的玻璃器皿的清洗
先用启来水冲洗，再置2％合成洗涤剂溶液中用毛刷刷洗，自来水冲洗，最后，用蒸馏水淋洗3次即可。
3．不能用毛刷刷洗的器皿
如容量瓶、刻度吸管等，可先用自来水冲洗沥干后，再用重铬酸钾洗液浸泡过夜，取出用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗3次，对口径较细的吸管，一定要注意吸管内壁的清洁和淋洗。
4．传染性标本污染器皿的清洗
对传染性标本污染过的器皿，应先将器皿浸泡在 5g／L过氧乙酸消毒液中浸泡过夜。吸管、滴管类应放在内盛消毒液的深玻璃筒(筒底垫玻璃纤维)中浸泡过夜，取出用自来水冲洗，再置合成洗涤剂溶液中刷洗，自来水冲洗后，用蒸馏水淋洗3次即可。
(三)干燥方法
1．自然干燥
是一种简单而实用的干燥方法，将洗净的器皿倒置在垫有干净纱布的柜内，或者是倒挂在专用架上，待其自然沥干。该方法适用于不急用或不能用高温烘烤的器皿，如量筒、量杯、容量瓶、吸管等。
2．烘烤干燥
除因高温使玻璃变形，改变容积，影响实验结果的玻璃量器外，其它玻璃器皿如试管、烧杯、三角烧瓶等，均可置120℃~150℃烤箱中烘烤干燥，对定量用的玻璃量器如吸管、量筒等，若需急用，可置中低温烘箱中干燥，烘烤温度应≤60℃。
