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极性键合相色谱仪固定相介绍

2019.12.21

极性键合相色谱仪固定相是由键型、主体基团和极性端基构成的键合相。

一、组成:

  1、键型:

        键型是整个极性键合基团与硅胶母体直接相连的桥梁。如SiOSiCSiOSiN

  2、主体基团:

        为直键烃基或醚基。使硅胶表面与特定的极性基团之间保持一定距离。

  3、极性端基:

        为极性基团。如氨基(-NH2)、氰基(-CN)、硝基(-NO2)和二醇基。

二、类型:

        氨基、氰基、芳硝基、二醇基和醚基键合相可用作正相色谱,主要以氢键力与溶质相互作用,氢键力大小顺序为氨基>氰基>芳硝基>二醇基>醚基。

  1、氨基键合相:

        氨基键合相是将氨丙硅烷基键合在硅胶上制成的。

        氨基键合相兼有质子接受体和给予体的双重性能,具有强极性。

        对具有较强氢键作用力的样品,显示强的分子间相互作用,k值较大。

        氨基具有碱性,可在酸性水溶液中作为弱阴离子交换剂,用于分离酚、羧酸和核苷酸。

        氨基用作反相固定相可与糖分子中的羟基作用,广泛用于单糖、双糖和多糖的分离。

        氨基柱不可用于羧基化合物(如甾酮和还原糖等)的分离。

  2、氰基键合相:

        氰基键合相是将氰乙硅烷基键合在硅胶上制成的。

        氰基键合相为质子接受体,具有中等极性,分离选择与硅胶类似,但比硅胶的保留值低。

        对酸性、碱性样品可获得对称的色谱峰。

        对含双键的异构体或双键环状化合物具有良好的分离能力。

        与氨基键合相比较,k值小。

  3、芳硝基键合相:

        芳硝基键合相具有电子转移功能,呈弱极性,对芳香族化合物和多环芳烃有良好的分离选择性。

  4、二醇基键合相:

        二醇基键合相呈弱极性,可分离有机酸和甾体,也可用作分离蛋白质的凝胶色谱的固定相。

  5、醚基键合相:

        醚基键合相呈弱极性,可分离形成氢键的化合物(如酚类和硝基化合物),也可用作分离蛋白质的凝胶色谱的固定相。


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