高效液相色谱串联质谱法检测鱼肉中5种头孢类药物
《肉类研究》2018年32卷2期刊载了浙江省水产技术推广总站的贝亦江、王扬、朱凝瑜、柯庆青、陈小芳、李诗言的论文《高效液相色谱-串联质谱法检测鱼肉中5 种头孢类药物》。本论文受浙江省水产品质量与安全技术支持团队国家特色(CARS-46)技术系统工程和浙江省水产品质量与安全技术支持团队的支持。
随着我国水产养殖业集约化程度的提高，水产养殖业中抗生素的使用越来越多，这往往导致抗生素的滥用。头孢菌素可引起多种酶，血胆红素含量增加，导致造血功能障碍。国内外头孢菌素类抗生素的检测技术大多是基于畜禽肌肉、牛奶和血浆样品。鱼类中头孢菌素类药物的检测往往不是重点，也鲜有报道国内外报道中头孢类药物的主要检测技术有微生物法、酶联免疫法、毛细管电泳法和色谱法，一般以高效液相色谱-串联质谱法为仲裁方法目前国家标准分析方法中提供了河豚鱼和鳗鱼中5 种头孢类物质残留量的检测方法但该方法缺少对其他鱼类的适用性，且预处理过程试剂用量较大对样品的净化程度不够，基质效应较大，也容易造成环境污染。
浙江水产技术推广站贝义江、王泱、朱景宇、柯庆清、陈晓芳、李世炎等人以浙江省主要养殖渔区的三种有代表性的淡水鱼、蛇头、草鱼和鳗鱼为研究对象，建立了一种广泛适用于鱼基质中头孢菌素检测的HPLC-MS/MS方法。
检测条件及结果
建立了鱼肉中5种头孢菌素类抗生素（头孢氨苄、头孢菌素、头孢哌啶、头喹诺辛、头孢唑林）残留量的高效液相色谱-质谱联用分析方法。通过固相萃取(固相萃取)、素HLB(6ml，200mg)纯化鱼基质采用AB-4500 液相色谱-串联质谱仪，C18RP-MS色谱柱（2.1 mm×100 mm，2.7 μm）以乙腈和体积分数0.1％的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.4 mL/min柱温30 ℃采用电喷雾离子源、正离子扫描、多反应监测模式和外部标准方法。结果表明，5种头孢曲松在0-75μg/kg范围内呈线性良好，8min内完全分离；5种头孢曲松检出限为0.5μg/kg，定量限为2.0μm。克/千克，10，25，40亩，克/千克，5种头孢曲松的平均回收率为81.0%~111.0%。相对标准偏差为0.41%~10.50%，批次平均回收率为84.7%~106.0%，相对标准偏差为0.88%~8.71%..
实际样品测定
将来自广东省周围水域和农场的五批海鱼和淡水鱼作为实际样本，包括11批草鱼、10批Pelteobagrusfulviddraco、5批普通话鱼、10批鲫鱼、5批大黄鱼、4批蛇头和5批黄鳝。结果表明，50批样品中未检出5种头孢菌素。
与国标方法比较
与国标方法对比本研究所确定方法的优势体现在以下几方面：
1提取溶剂体积由35 mL减少至8 mL，节约了有机试剂用量，减少了对环境的污染；
2样品净化方式由液-液萃取改为固相萃取，能更有效地去除杂质，减少基质效应；
3基质种类由河豚鱼、鳗鱼增加至养殖量更大、养殖范围更广的乌鳢、草鱼和鳗鱼，拓展了方法的应用范围；
4质谱进样时间由15 min减少至8 min，提高了检测效率。
结 论
本研究采用高效液相色谱-质谱联用（ms/ms）法测定鱼基质中5种头孢菌素的残留量，结果表明，该方法的准确度和精密度仍符合实验要求与现有国家标准方法相比本研究确定的方法弥补了样品基质的不足，降低了检测限和定量限，节省了试剂量和预处理时间，符合国内外头孢菌素残留检测的要求。
