色谱分析法基础知识(一)
色谱法的创始人是俄国的植物学家茨维特( M.Tswett)。1906年,俄国植物学家茨维特发表了他的实验结果:为了分离植物色素,他将含有植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中,并用石油醚自上而下淋洗,由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同,随着淋洗的进行,不同色素向下移动的速度不同,从而形成一圈圈不同颜色的色带,使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法(chromatography)。
色谱法是非常重要又常用的分析方法,今天咱们补充基础知识哦。
伟大的茨维特
植物叶色素的分离实验
☞ 茨维特实验图示
√ 色谱柱—玻璃柱
√ 固定相—CaCO3颗粒
√ 流动相—石油醚
随着分离手段的不断发展,越来越多的无色物质成为被分离的对象,色谱也渐渐失去了“色”的含义,但这个名称却沿用至今。
色谱分析法(Chromatography)简称色谱法或层析法,是一种物理或物理化学分离分析方法,该法利用某一特定的色谱系统(薄层色谱、高效液相色谱或气相色谱等系统)进行混合物中各组分的分离分析,主要用于分析多组分样品。
▪ 固定相:在色谱分离中固定不动,对样品产生保留的一相。
▪ 流动相:带动样品向前移动的另一相。
分类
按两相物理状态分类
▪ 流动相:气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱
▪ 固定相:气-固、气-液;液-固、液-液
按固定相的形式分类
▪ 柱色谱:填充柱色谱、毛细管柱色谱、微填充柱色谱、制备色谱
▪ 平面色谱:纸色谱、薄层色谱、高分子膜色谱
按分离机制分类
▪ 吸附色谱:根据不同组分在吸附剂上的吸附和解吸能力的大小而分离
▪ 分配色谱:根据不同组分在固定液中溶解度的大小而分离
▪ 分子排阻色谱:依据分子体积大小不同进行分离ln离子交换色谱:不同组分对离子交换树脂的亲和力不同而分离
▪ 亲和色谱:利用生物大分子之间的存在的专一的特殊亲和力进行分离
▪ 毛细管电泳:依据各组分淌度和(或)分配行为的差异进行分离
▪ 手性色谱:用于手性药物的分离分析,可分为三类:手性衍生化试剂法;手性流动相添加剂法;手性固定相拆分法
基本术语
色谱分离过程
色谱法的基本术语
检测色谱分离后组分的响应信号对时间作图得到的曲线称为色谱图。
色谱流出曲线