1. 剪切
把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止; 2. 摆布
用弯头吸管吸取若干小块,置入培养瓶中;用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底上,小块相互距离以0.5 cm 为宜,每一25 ml培养瓶底可摆布20~30 块; 3. 轻轻翻转培养瓶,令瓶底向上;注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞,置36.5 ℃温箱2 小时左右(勿超过4 小时),使小块微干涸;
4. 培养
从温臬中取出培养瓶,开塞,46 度斜持培养瓶(瓶底仍向上),向瓶底角部轻轻注入培养液小许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶底上的组织小块(组织小块附着尚不牢,注意不要把组织块冲走);置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后,再补加培养液。
展开 |