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活性GLP-1(7-36)特异性酶免试剂盒使用说明

2020.7.06

【预期用途】

该高灵敏度ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是专门用来定量检测血清样本中的胰高血糖素样肽-1(7-36)[GLP-1(1-36)]的浓度。哺乳动物中的GLP-1肽链的基本氨基酸序列完全相同,如:小鼠、大鼠、猪、狗、猴、人等。该试剂盒仅适用于科学研究。

 

【实验原理】

这个ELISA的设计,研发和生产的目的是对血浆样品中的活性GLP-1(7-36)进行定量检测。该试剂盒是基于运用两个GLP-1(7-36)特异性抗体分别与两个位点结合的“双位点夹心”技术。

将标准品、质控品、和待测样品加入链霉亲和素包被的微孔板中。随后,将生物素偶联的的GLP-1(7-36)特异抗体和HRP标记的GLP-1(7-36)特异抗体混合物添加到各个孔中。经过第一个保温孵育期后,形成了“链霉亲和素-生物素抗体- GLP-1(7-36)-HRP标记抗体”的“双位点夹心”结构,该复合体被微孔板的内壁吸附住。游离的HRP标记抗体和缓冲基质则在洗涤过程中被冲走。微孔板加入过氧化物酶基质(3,3',5,5'-四甲基联苯胺,TMB)并经过一段时间的反应后,用酶标仪测量吸光度。微孔板内壁的免疫复合体的酶活性与样本中的GLP-1(7-36)浓度成正比。

 

简要实验步骤:

 

  • 在各孔中添加100µL的标准品、质控品和病人样本;

  • 在各孔中添加100µL抗体混合物;

  • 2-8℃静置培养20-24小时;

  • 用稀释洗涤缓冲液洗净条带;

  • 各孔中添加200 µL的TMB基质;

  • 室温下静置20分钟;

  • 添加50 µL终止液;


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