临床微生物学尿培养操作规范（二）
二、实验室检查
1．涂片检查：尿路感染标本可直接做细菌培养，无需常规进行涂片检查。对于临床怀疑淋病奈瑟菌、假丝酵母菌或结核分枝杆菌感染的标本可用无菌吸管吸取尿液5-10ml置无菌试管中，3000-4000r/min离心30min，倾去上清液，取沉渣涂片，行革兰染色或抗酸染色后镜检。
2．细菌培养：(l）普通培养：将收集标本的容器轻轻旋转混匀，用定量接种环分别取尿液lul涂抹接种血平板和麦康凯平板（或中国蓝平板），35-37℃培养18-24h，观察结果。对导尿、耻骨上膀胱穿刺和已使用抗生素治疗的患者标本应增加一个10ul接种量。（2）特殊培养：对怀疑有苛养菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺或导尿法采集样本，加种一块巧克力平板，置5%CO2环境中培养48h。检查淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌感染时无需做定量培养，可将标本离心后取尿沉渣进行培养，以提高阳性率。（3）普通培养18-24h无细菌生长时，应将所有培养基继续培养24h。
表1 尿路感染的原因及常见病原菌 | ||
感染原因 | 主要致病菌 | 感染特点 |
上行感染 | 大肠埃细菌、克雷伯菌、变形杆菌、淋病奈瑟菌 | 主要为肠道菌群或会阴部细菌逆行感染，多见于女性，多为单一细菌感染，以大肠埃希菌感染最常见。 |
泌尿系统解剖结构和生理功能改变引起的感染 | 大肠埃细菌、克雷伯菌、变形杆菌、普罗威登菌、沙雷菌、不动杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、肠球菌 | 多见于留置导尿管、肾盂造瘘术、尿路结石、尿路重建、前列腺肥大、膀胱排空能力受损的患者，容易发生多种微生物的混合感染，易被误认为标本污染。 |
血行感染 | 葡萄球菌、结核分枝杆菌、沙门菌 | 发生于菌血症的患者，血液中的细菌通过血流进入肾脏引起感染，比较少见。 |
直接感染 | 大肠埃细菌、葡萄球菌、链球菌、肠杆菌 | 外伤或肾周围器官发生感染时，细菌直接侵入肾脏引起感染，非常少见。 |
表2 不同方法采集的尿标本培养结果评价 | ||
标本来源 | 菌落数CFU/ml | 结果评价 |
清洁中段尿 | ＜5×104 | 无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯培养或是混合菌生长。 |
（5-10）×104 | 纯培养有意义，报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果；混合菌生长无意义，仅做革兰染色镜检，并报告镜检结果。 | |
＞105 | 纯培养或混合菌生长，其中某种菌落数≥105者有意义，需进行细菌鉴定和药敏试验；4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染。 | |
导尿 | ＞103 | 3种以内细菌生长都有意义，对2种主要生长菌需进行细菌鉴定和药敏试验；4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染。 |
耻骨上膀胱穿刺 | 任意数目 | 都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定和药敏试验。 |
