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临床微生物学尿培养操作规范(三)

2021.4.24

三、结果观察和报告

1. 结果观察和评价:(l)菌落计数:计数平板上的菌落数,采用1ul接种量者,将菌落数乘以103;采用10ul接种量者,将平板菌落数乘以102,即为每ml尿液中所含有的细菌数(CFU/ml)。如菌落生长过多无法精确计数时,则报告>105CFU /ml。(2)结果评价:正常情况下从肾脏排泌至膀胱的尿液是无菌的,但膀胱中的尿液经尿道排出体外时可受到下尿道中正常菌群的污染,而出现细菌。因此对不同方法获取的尿液标本培养结果需正确评价,才能有效指导临床合理治疗。一般认为,清洁中段尿标本中单种细菌菌落数>105 CFU/ml可能为感染;<5×104CFU/ml可能为污染,在两者之间需要根据具体情况进行评估。

2.阴性培养结果报告:培养48h无菌落生长,即为阴性。接种lul尿量者,应报告“培养48h,菌落计数<103CFU/ ml”;接种10ul尿量者,应报告“培养48h,菌落计数<102CFU/ml”。

3. 阳性培养结果报告:无意义的阳性培养结果报告;纯培养报告“革兰×性×菌生长,菌落计数:××CFU/ml”;混合菌生长报告“革兰×性×菌和革兰×性×菌混合生长”。有意义的阳性培养结果报告:报告菌落计数、细菌种属名称及标准抗菌药物敏感性试验结果。

附录
1. 关于尿培养标本的接种:由于自然排尿收集的标本很难避免会阴部及下尿道细菌污染,所以需要定量接种、合理评价才能判断培养的细菌是否与尿路感染有关。定量接种的方法有直接划线法和倾注平板法两种,后者由于操作步骤繁琐,已几乎不被临床实验室使用。直接划线接种法的关键是应保证接种量的准确性,可使用1ul或10ul的定量接种环,方法是将接种环校准后,以垂直方向持拿,使环圈刚好浸人尿液表面(不可使尿液碰到环上方的环柄),取尿液进行接种。无定量接种环的实验室,可使用无菌的5ul微量移液器吸取尿液加人平板,再用接种环划线接种,将平板菌落数乘以200,即为每ml尿液中所含有的细菌数(CFU /ml)。

2.关于尿培养检验培养基的选择:没有一种平板可以适合所有尿道病原体的生长,所以应该根据标本来源及临床对目标菌的要求选择适合的培养基和培养条件。普通培养推荐使用血平板和麦康凯(或中国蓝)平板,不能以血平板代替麦康凯或中国蓝平板。

3. 关于尿培养结果评价:菌落计数>105CFU/ml时只是判诊断尿路感染的一般标准。对一个实验室而言,如果仅使用一个标准对实验结果进行解释,那么若标准制定过松,将会造成抗生素滥用和不必要的资源浪费;制定过严,将有可能导致尿路感染的漏诊。所以每个实验室应在与临床医师密切合作的基础上,根据不同的情况制定不同的解释标准。尿培养菌落计数可受多种因素的影响,在一些患者即使菌落数较少,也有明显的临床意义,所以对菌落数<5×104CFU/ml,“规范”中认为无意义的阳性结果,不应随意丢弃,必要时应很据患者的具体情况或与临床医师联系后,决定是否需要做细菌鉴定和药敏试验。以下因素可使尿液中细菌数量减少,判断结果时应予以注意:(l)使用抗生素治疗,细菌生长受到抑制;(2)尿液稀释,尿比重<1.003,营养成分减少,细菌生长迟缓;(3)尿pH <5.0或>8.5,细菌生长受阻;(4)尿频时,膀胱内细菌停留时间短,菌落数减少;(5)尿道口消毒液混入标本中,影响细菌繁殖,菌落数减少;(6)不同种类的细、生长速度不同、营养要求不同,菌落计数有所不同,有文献推荐:革兰阴性菌以菌落计数>105CFU/ml,而革兰阳性菌以菌落计数>104CFU/ml为诊断尿路感染的标准。

4. 尿培养检验中常见的错误:(l)将尿液标本接种于增菌液中;(2)将中段尿标本离心后取沉渣进行一般细菌培养;(3)标本保存时间超时,细菌大量繁殖;(4)直接用导尿管头划线培养;(5)使用中段尿标本做厌氧菌培养。


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