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自动化荧光免疫分析系统—时间分辨荧光免疫分析仪

2021.5.10

  时间分辨荧光免疫分析仪

  (一)原理

  属于非均相荧光免疫测定,镧系元素属于三价稀土离子,包括铕(Eu3+),钐(Sm3+),铽(Tb3+),钕(Nd3+)和镝(Dys+)等,它们的荧光寿命较长,尤其是Eu3+和Tb3+的荧光寿命特别长且荧光强。因此,时间分辨荧光免疫测定中多用Eu3+和Tb3+为标志物。以镧系元素(尤其是铕(Eu3+))标记抗原或抗体作为示踪物,它的激发光谱带较宽,发射光谱带窄,来自生物样品的荧光干扰少。激发光谱和发射光谱之间的位移大,能有效地分开激发光和发射的荧光。

  (二)分析物解离增强原理

  被镧系元素标记的抗体或抗原形成IC在弱碱性反应液中经激发后的荧光信号较弱,必须再加入增强液,使IC的pH降低至2~3,以利于Eu3+从复合物上解离,游离的Eu3+与另一种螯合剂结合,形成高强度荧光的稳定螯合物,又将该技术称为解离增强镧系元素荧光免疫(DELFIA),这是目前在时间分辨荧光免疫分析中应用最多的一种分析系统。

  (三)注意事项

  1.TRFIA分析用的酸性增强液易受环境、试剂、容器等里面的镧系元素污染,使本底升高,所用试剂和器材应尽量防尘。

  2.载体最常用的是聚苯乙烯微96孔板,其荧光本底低。

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