筛选寡核苷酸针的原则
一.长18～50nt，较长探针杂交时间较长，合成量低；较短探针特异性会差些。
二.碱基成分：G+C含量为40%～60%，超出此范围则会增加非特异杂交。
三.探针分子内不应存在互补区，否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。
四.避免单一碱基的重复出现（不能多于4个），如-CCCCC-。
五.一旦选定某一序更符合上述标准，最好将序列与核酸库中核酸序列比较，探针序列应与含靶序列的核酸杂交，而与非靶区域的同源性不能超过70%或有连续8个或更多的碱基的同源，否则，该探针不能用。
按上述原则选出的探针会增加成功的机会，选定后进行合成与标记，并摸索合适的杂交条件。方法是制备几张点有特异靶DNA和不相关DNA的膜，各膜分别在不同温度下与探针杂交，特异靶DNA杂交信号强而非特异DNA不产生任何杂交反应的就是最适杂交温度。在进行点突变检测杂交的反应时，洗膜条件和温度物选择往往更为重要。所选漂洗条件必需使野生型靶DNA与探针产生强的杂交信号而突变型靶DNA则不产生杂交信号，这可以通过逐渐提高洗膜温度来完成。
推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
询底价 Tel：400-6699-117 转 7335 -
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
