肾阳虚外感模型的制备
实验概要
建立肾阳虚外感复合病证小鼠模型，为研究肾阳虚外感的发病机制及药物干预提供较理想的实验模型。
实验原理
先采用苯甲酸雌二醇腹腔注射建立肾阳虚小鼠模型，然后滴鼻感染流感病毒Flu A（FM1）株，建立肾阳虚外感小鼠模型。
主要试剂
苯甲酸雌二醇：4mg/2ml/支，宁波第二激素厂110906
注射用大豆油：浙江田雨山药用油有限公司110502
0.9％生理盐水：山东结晶药业有限公司11071272
流感病毒甲型(Influenza Virus A， Flu A)北京地方株引自中国CDC病毒病研究所
主要设备
电子体温计 MC-142L：欧姆龙（大连）有限公司
YP601N电子天平：上海精密科学仪器有限公司
手提式压力蒸汽灭菌器：宁波市镇海金鑫医疗器械有限公司
干燥箱：（中国）上海福玛公司
DT-880B手持式人体表面温度快速筛检仪：深圳市华盛昌机械实业有限公司
ZIL-2型小鼠自主活动仪：北京医科院药研所
器械：1ml注射器、EP管
实验材料
雄性昆明小鼠，体重20g±2。由山东鲁抗动物实验中心提供（许可证号：SCXK(鲁)20080002）。
实验步骤
1. 肾阳虚模型制备
将KM雄性小鼠，适应环境2d，随机分为正常对照组和模型组。正常对照组按体重0.2ml/10g腹腔注射0.9％生理盐水；根据本课题组前期实验，模型组参考文献方法并改进造模剂量，按体重0.2ml/10g腹腔注射0.4mg/ml苯甲酸雌二醇稀释液，每日1次，并自由饮水、饮食，连续15d，复制肾阳虚模型。
指标检测:观察肾阳虚小鼠一般体征。于给药第13d测定游泳时间，超过1h的以1h计；给药第14d测量肛温、趾温；给药第15d记录10min内小鼠自主活动次数。
2. 肾阳虚外感模型制备
将Flue A鼠肺适应株（FM1）用9日龄鸡胚传代，测定其血凝滴度为1:80，通过滴鼻途径感染小鼠，参考预实验结果，肾阳虚模型组每只小鼠接种鼠肺病毒尿囊液50μL，对照组小鼠经鼻腔滴入等量的生理盐水。
将小鼠放入独立的房间饲养，接种后每天观察小鼠的精神状态和表现（每天称重、量体温），并记录小鼠的发病和死亡情况，期间小鼠可自由饮食，饮水。
注意事项
1.本实验所用动物体重接近。
2.实验操作时需要戴手套、口罩，实验前后肥皂洗手，注意个人防护。
3. 实验所用病毒液应通过预试验加以确定。
4. 实验器械使用前后均应注意高压灭菌。
5. 滴鼻感染成功与否，取决于动物的捉拿，病毒液滴入量的多少。
6. 流感病毒应在-70℃保存备用。
7. 试验后消毒操作台面。
8. 试验环境：室温25℃，湿度60％
