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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒说明书

2021.3.01

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒说明书

 


P1200-25T P1200-50T 保存条件
30%制胶液(29:1) 100mL 100mL×2 4℃,避光
1.5mol/LTris(pH8.8) 100mL 100mL×2 常温
1.0mol/LTris(pH6.8) 30mL 60mL 常温
PAGE胶凝固剂 1g 2g 干粉4℃;溶液-20℃
10%SDS 5mL 10mL 常温
PAGE胶促凝剂 0.8mL 1.5mL 4℃,避光


产品简介:
本公司生产的SDS-PAGE凝胶制备试剂盒是按照经典方法配制而成。本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶。本试剂盒可配制不同规格、不同聚合度的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶) 约25/50块。
注意事项:
1. PAGE胶促凝剂和10%PAGE胶凝固剂最后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%PAGE胶凝固剂溶液在4℃有效期为一周; PAGE胶促凝剂易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固,如温度过低,可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加1mL ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸水纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。
2. 配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30% 制胶液的量(需要浓度×总体积/30%),最后用水补足总体积。
配胶说明:
1. 先在PAGE胶凝固剂干粉中加入蒸馏水或去离子水(每克PAGE胶凝固剂需加水10mL)配置成10%溶液,将溶液分装成小体积后冻存于-20℃,制备凝胶时融化后使用。4℃保存有效期为一周。检测SDS溶液是否澄清,若出现絮状物或沉淀可放37℃片刻至溶解,不影响效果。
2. 根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。
 


分离胶15% 分离胶12% 分离胶10% 分离胶8% 浓缩胶5%
总体积 10mL 10mL 10mL 10mL 5mL
30% 制胶液(29:1) 5mL 4mL 3.3mL 2.7mL 0.83mL
1M Tris-HCl (PH6.8) 0 0 0 0 0.625mL
1.5M Tris-HCl(PH8.8) 2.5mL 2.5mL 2.5mL 2.5mL 0
10%SDS 100μL 100μL 100μL 100μL 50μL
10%PAGE胶凝固剂 100μL 100μL 100μL 100μL 75μL
PAGE胶促凝剂 10μL 10μL 10μL 10μL 7.5μL
ddH2O 2.3mL 3.3mL 4.0mL 4.6mL 3.42mL
最佳分离范围 10-40kD 12-60 kD 20-80 kD 30-90kD

 


注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。


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