正相液相色谱方法
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽，氰基柱通常是首选；与氰基柱相比，硅胶柱可获得更大的值，适合于异构体和疏水性溶质的分离，但分析时必须严格控制流动相中水含量，也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差，仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用；氧化铝柱具有独特的分离选择性，但有柱效低、保留值不定、回收率低等缺点，很少使用。
一般来说，柱尺寸为0.46cm×25μm×5μm，初始流速设为2ml/min，柱温为35℃或室温，初始进样量较大，但不应超过50μl或50μg。
正相液相色谱流动相首选是正己烷和丙醇组成的混合溶剂，正已烷-丙醇不仅在低紫外波长区吸收较弱，还可提供较宽的溶剂强度范围，适于分离极性差异较大的样品。除正己烷外，溶解性较好的1,1,2—三氟三氯乙烷（FC113）也可作为混合溶剂中的A溶剂，由于在低波长吸收较强，只能用于235m以上的检测，并且其对臭氧的破坏作用也限制了其使用。除丙醇外，B溶剂还可采用二氯甲烷、甲基叔丁醚、乙酸乙酯、乙腈等，其中丙醇适于低波长检测（<215m）条件下强极性样品的分离:二氯甲烷是高波长（>235nm）检测条件下的B溶剂首选，但洗脱强度较低:甲基叔丁醚和乙酸乙酯可在225nm以上波长使用，其加入可改变α值:乙腈也可改变样品的α值，并在195mm以上波长范围均无明显紫外吸收，但是与正己烷的混溶性较差，需要另外加入共溶剂才可使用。
与反相液相色谱方法优化过程相似，可采用0~100％丙醇-正己烷初始梯度在氰基柱上进行初始条件分离，根据结果调整梯度程序或估算等度分离条件。为了调节分离选择性，可调节B％或采用两种B溶剂，但流动相中通常不应超过三种溶剂。当仅改变流动相组成效果不明显时，可改变柱类型以获得更好的分离效果。
在正相液相色谱柱上，流动相中的极性溶剂与固定相相互作用较强，调整流动相比例时需要更长的平衡时间（至少20倍柱体积）。
水是强极性溶剂，与硅胶或氧化铝键合相当牢固，流动相中含有的微量水分会被固定相从流动相中萃取出来，导致保留时间下降。流动相中水分受到空气湿度影响，难以保证流动相的含水量固定不变，因此，采用硅胶柱时，通常会用一定量的水平衡流动相，保证含水量稳定。
