免疫细胞化学方法
1、细胞爬片;
2、PBS洗3次×5min;
3、4%多聚甲醛固定30min(4度冰箱中);
4、3%H2O2 封闭内源性过氧化物酶,室温下10min;
5、PBS洗3次×5min;
6、10%动物血清封闭,室温下10min;
7、甩去血清(不洗),一抗4℃ ;细胞
8、PBS洗3次×5min;
9、二抗室温下1h (或37℃*30min);
10、PBS洗3次×5min;
11、SABC复合物室温下30min~1h (或37℃*30min);
12、PBS洗3次×5min;
13、DAB显色,镜下观察,自来水终止;
14、苏木素复染;
15、梯度酒精脱水:70%酒精、80%酒精、90%酒精各5min ,95%酒精5min×2,100%酒精5min×2;
16、二甲苯透明20min,中性树胶封固。细胞
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