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Absin 细胞生物学常用试剂——细胞染料

2021.6.03

IP(碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测。碘化丙啶是一种核酸染料呈红色,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红,用PI 单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡。
 

Annexin-V 染色:细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变。其中磷脂酰丝氨酸外翻,Annexin-V在钙离子存在的条件下与其高亲和力特异性结合。这样Annexin-V染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态。Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检查细胞凋亡的发生,Annexin-V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。
 

JC-1 染色:JC-1是一种阳离子染料,可以在线粒体内聚集,低浓度时主要以单体存在,发射光以绿光为主;而在高浓度时则可以形成多聚体,发射光以红光为主。线粒体本身存在一定的极性,其外膜为负极,内膜为正极。电位差由钙离子、钠离子和氢离子流调控。当线粒体状态良好时对JC-1摄取量少,因而在线粒体内主要以单体的形成存在绿光强度/红光强度的比值较高。在线粒体发生去极化时,线粒体内JC-1的浓度较高,多以多聚体的形式存在,绿光强度/红光强度的比值降低。
 

钙黄绿素-AM(Calcein-AM): Calcein-AM 本身并不是荧光分子,但通过活细胞内的酯酶作用Calcein-AM能脱去AM基,产生的Calcein 能发出强绿色荧光。因此Calcein-AM仅对活细胞染色。


台盼蓝染色:通常认为细胞膜丧失完整性,细胞即可被认为已经死亡。台盼蓝是检测细胞膜完整性常用的细胞染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色。从而实现对细胞存活率比较好的定量分析。


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