关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

顺反异构体的分析测定方法

2022.11.03

高效液相色谱法

HPLC法在顺反异构体药物的分离分析中应用广泛,其可与多种检测器联用,在分离分析高沸点、大分子、热稳定性差的化合物方面具有极大优势,而其对顺反异构体的分离选择性和检测精确度主要取决于选用合适的色谱柱和检测器。

毛细管电泳法

CE法对带电荷物质的分离效果显著,但有时为改善峰形或提高分离度,需在测试样品中添加合适的添加剂,如十二烷基磺酸钠(SDS)、β-环糊精等,或采用非水CE法。胡琴等(中国药学杂志,2001年)采用未涂层石英毛细管柱,以含0.5%羟丙基β-环糊精的50mmol·L-1磷酸二氢钠溶液(pH2.5)为运行缓冲液,于297nm波长下,分离检测盐酸多塞平的Z/E-异构体,其检测结果与HPLC法所得结果相近。随后,该研究小组又建立了非水CE法分离盐酸多塞平异构体,缓冲液为加入3.0%冰醋酸200mmol·L-1醋酸铵的甲醇-乙腈(95∶5)溶液,无需使用任何在毛细管区带电泳分离异构体时常用的添加剂即可在12min内完成分析,分析速度更快。

气相色谱法

GC法分离效率高,样品用量少,选择性好,可分离分析顺反异构体、旋光异构体等,常用于在实验温度下可气化且性质稳定的物质的分析,对于那些热不稳定或难以气化的物质,可通过化学衍生化方法使其达到GC分析的要求。多塞平的Z-和E-异构体具有不同的沸点,可选择GC法对二者进行分离,但因填充柱对多塞平存在吸附作用,使得色谱峰峰形较差,故研究者常选择使用毛细管色谱柱采用程序升温法,将HP-1毛细管柱温自起始温度90℃以30℃/min-1的速度升至200℃,然后以10℃/min-1的速度升至280℃,使马子宫和血浆中的多塞平及其代谢物的异构体在短短六分钟内得到分离。

紫外分光光度法

紫外分光光度法作为一种传统的分析测试方法,具有操作简便、分析快速等优点,且测样费用也较液相色谱法低 。但该法用于多组分尤其是同分异构体的同时测定时,由于各组分光谱的相互重叠 ,给各组分的定量分析带来了一定的困难,因而限制了它在多组分同时测定分析中的应用。将化学计量学的多元校正技术如偏最小二乘法 (PLS)用于光度法分析领域,可不经分离进行多组分的同时测定,为具有光度响应的多组分同时测定提供了一种有效的分析方法。


推荐
关闭