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使用高效液相色谱仪必须知道的四个因素

2020.1.21

1.高效液相色谱仪本身:

高效液相色谱仪本身一般没有问题,特别是刚买来的新仪器。对于高效液相色谱仪仪器本身来说,最重要的是仪器的校准。卖方通常先确认仪器系统(包括IQ、PQ、OQ)。确认工作顺利通过后,请国家或省仪器检定局进行核查。验证合格后,方可安全使用。此外,其中一些可以安全使用。做得好的公司每半年对仪器进行一次内部校准,以确保仪器的正常运行。

2.色谱条件:

高效液相色谱仪的色谱条件一般包括高效液相色谱仪的流动相,液相色谱柱,检测波长,流速和进样量。流动相包括流动相所用的水和试剂试液的制备。电阻率不超过18.2兆欧的水一般需要超纯水或其他水。试剂试液需要色谱水平。其原因是为了防止水中杂质和试剂试液对色谱结果的干扰。

色谱柱根据不同品种具有不同的要求,但各色谱柱具有其清洗要求。这可以在色谱柱质量标准中找到,这必须按照上述要求进行,否则会导致色谱柱效率的降低和色谱柱的使用寿命的缩短,并且检测波长也将根据品种具有不同的要求。在此应当指出的是,应当注意探测器重氢灯的能量的变化。例如,基线的大波动和活性成分的响应值的突然降低可以由重氢灯的能量缺乏引起。重氢灯一般建议800小时,但实际上,它可以根据实际情况进行更换。

流量因品种而异,一般为1.0ml/min,流量不能随意改变,特别是作为质检人员。但作为研发人员,有时为了探索条件或验证方法的耐久性,会改变流量来评价方法的适用性。由于品种不同,对注射量有不同的规定。注射量现在用于自动注入,所以注射精度很高,不需要强调任何东西。

3.操作人员:

首先,作为一个液体操作者,我们必须认真学习夜间思维的指导,掌握液体软硬件的操作,掌握日常维护,掌握最基本的故障排除和维护。当然,凝胶对液相的日常维护非常重要,如流动相的过滤、除气、泵垫片的清洗、系统管道的清洗、溶剂过滤头的清洗等,如果不附着,很容易导致色谱柱的堵塞。不必要的故障,如系统压力过大、色谱峰异常等,浪费时间。第二,制备液相分析用样品溶液时,操作人员应单独由同一人完成,以避免不必要的意外误差。

4.液相安装环境:

高效液相色谱仪应尽可能安装在桌子上的室内水平,远离振动和电磁干扰。在有条件的情况下,应尽可能分离液相数据处理系统。一是防止高效液相色谱仪的色谱基线噪声过大,基线不稳定,二是减少对人体的危害。


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