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外泌体(Exosomes)分离提取方案

2020.5.26

外泌体(Exosomes)是细胞经过"内吞-融合-外排"等一系列调控过程而形成的直径在30~100 nm的圆形单层膜结构的细胞外小囊泡。外泌体由机体众多类型细胞释放,并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液当中,可以携带蛋白,运送RNA,在细胞间物质和信息转导中起重要作用。外泌体可能通过调控免疫功能,促进肿瘤血管新生和肿瘤转移,以及直接作用于肿瘤细胞等途径,影响肿瘤的进展。

由于外泌体的特殊结构和功能,使得它具有潜在的应用价值,一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标,另一方面也可以作为治疗手段,未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗。外泌体的分离纯化一直是科研工作者关注的问题,获得高纯度的外泌体对后续的研究至关重要。

Exosomes-basic

图1:外泌体通路示意图  

超离法是最常用的外泌体纯化手段,采用低速离心、高速离心交替进行,可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单,获得的囊泡数量较多而广受欢迎,但过程比较费时,且回收率不稳定,纯度也受到质疑;此外,重复离心操作还有可能对囊泡造成损害,从而降低其质量。

如何简单有效地提取外泌体呢?

ExoPure™ Reagent 是基于化学沉淀的原理,可以一步法快速分离提取微粒体,并适用于生物液体和细胞培养基。



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