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毛细管电泳色谱仪压力进样技术

2019.12.23

毛细管电泳色谱仪压力进样要求毛细管内的填充介质具有流动性,当毛细管两端置于不同的压力环境中时,管内溶液流动,将样品引入。

一、进样动力:

进样动力有进样端加压(正压)、出口端抽真空(负压)和虹吸(重力)。

1、进样端加压:

采用压缩空气(钢瓶气)可实现正压进样,并可与毛细管清洗系统共用。多采用。

2、出口端抽真空:

负压进样要求控制设计特别精密,否则容易因泄露等原因出现不重复进样。

3、虹吸:

调节进样槽和出口槽之间的相对高度使之产生虹吸作用,将样品引入。

二、进样质量:

压力进样时,在时间t内,进入毛细管的样品质量Q为:

        Q =ΔP×πr4Ct/8ηL

式中:r为毛细管内径,L为毛细管总长度,ΔP为管两端的压力差,C为样品浓度,η为管内溶液粘度。

电动进样的控制参数是管两端的压力差ΔP和进样时间t。其中ΔP通常为03450Pat通常为15s,有时可达60s或更大。

利用重力进行虹吸进样时,ΔP正比于毛细管进、出口液面的相对高度ΔH,进样量也可由ΔH控制。

        ΔP = ρgΔH

 式中:ρ为缓冲液密度;g为重力加速度;ΔH通常为520cm,多取10cm,对应的t多为510s

ΔH大,进样快速,但毛细管上下移动幅度大,不利于控制,也不利于仪器的设计。

三、特点:

1、优点:

1)进样量与组分的淌度无关,不存在电动进样中的歧视效应。进样量不受样品基质的影响,应用广泛。

2)若严控样品粘度和温度,则进入毛细管的样品质量恒定。

2、缺点:

压力进样选择性差,样品和背景同时被引入毛细管内,对后续分离可能产生影响。

  


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