CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪方法介绍
CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪方法介绍
黄曲霉素快速检测仪原理：利用用固相酶联免疫吸附原理，利用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板，加入黄曲霉毒素标准品或样品进行免疫反应后，将未与包被抗原结合的抗体洗去;再加入酶标记的抗鼠IgG抗体孵育，加入底物显色，终止液终止后，用CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪在450nm处测定OD值。
快速检测实验操作所需的试剂及材料：微孔板 包被有AFB1-BSA；5个浓度的AFB1标准溶液各(1mL)可直接使用；
标准1：0ng/mL 可直接使用；
标准2：1.0ng/mL可直接使用；
标准3：2.0ng/mL 可直接使用；
标准4：5.0ng/mL可直接使用；
标准5：10.0ng/mL 可直接使用；
AFS单克隆抗体溶液(6mL)可直接使用；
酶标物(12mL)可直接使用；
显色液(12mL)；
终止液(6mL)；
浓缩洗液(30mL) ；
空白对照(6ml)微孔板CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪(含450nm)：定量分析用；振荡器，粉碎机，微量移液器，量筒，漏斗和容量瓶，快速定性滤纸；试剂：氯化钠(分析纯)、甲醇(分析纯)、去离子水或蒸馏水
检验操作注意事项：标准溶液中含有黄曲霉毒素，应特别小心。使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液最好用pH7的次氯酸溶液(10%v/v)浸泡过夜。终止液为0.5N硫酸，避免接触皮肤。不要交换使用不同批号盒中的试剂。
黄曲霉素检验实验样品前处理：样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存，取5g粉碎的有代表性的样品，加1.25g氯化钠及25mL70% 甲醇-水，强力振荡3分钟；用快速定性滤纸过滤；取1mL滤液，用1%氯化钠溶液稀释10倍；取50μL稀释液进行分析；据需要可以增加样品量，但甲醇溶液的量也应相应增加。
检验实验注意事项和测定程序：每次加样后立即将所有试剂放回2-8 ℃，每步操作时间控制在5min内， 孵育过程中应避光。测定程序1. 取所需数量的板条插入微孔架，记录样品及标准的位置。
2. 加入50mL标准品或处理好的样品到微孔，每个标准和样品必须使用新的吸头。
3. 将50mL抗总黄曲霉毒素单克隆抗体使用液加入到每个微孔(注意移液器管尖不要接触到放进孔中的液体，避免交叉污染)，在适当位置孔加空白对照液100mL，37℃孵育90min。
4. 甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板3min×3次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
5. 每孔加入酶标物100mL，37℃孵育60min。
6. 甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板3min×3次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
7. 每孔加入显色液100mL(2滴)，37℃孵育10 min -12min。
8. 每孔加入终止液50mL(1滴)，立即用CSY-E96H黄曲霉毒素快速检测仪在波长为450nm处测定吸光度值(OD值)。
