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Taq DNA聚合酶（with MgCl2 in Buffer）使用说明

2020.6.15

『注意事项』
1. 长期储存（非频繁使用）于-70ºC；每天或每周使用储存于-20ºC。尽量避免多次冻融，勿暴露在温度波动较大之处，这些波动对产品的稳定性有一定影响。
2. 建议在100l反应液中，酶的使用量为1~2.5l。过多酶量和过长的延伸时间可能会引起非特异扩增条带。
3. 为确保实验结果，建议使用本公司配套缓冲液及相关试剂。
4. 扩增结果与反应体系、Mg2+浓度、引物、循环参数等因素有关。为了减少不必要的优化过程、节省时间和保证试验结果的稳定可重复，推荐使用本公司的PCR SmartMix。

产品编号：TQ-01/02/03/04

MyLab® Taq DNA聚合酶
（with MgCl2 in Buffer）

使用说明书
『规格』5U/l; 100l; 500U。
『特点』
本制品是分子量为94 kDa的耐热的DNA聚合酶。是将栖热水生菌（Thermus aquaticus）DNA Polymerase的基因克隆后，在大肠杆菌中表达后，分离纯化而得到的。它与天然的Taq DNA聚合酶有相同的功能。该酶反应需Mg2+参与，它以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向3’末端形成双链DNA。该酶不具有5’-3’核酸外切酶的活性。该产品主要用于DNA的PCR扩增，DNA测序等。PCR产物3' 端为A，可用于T/A克隆。在70~75ºC时，DNA聚合的速度每秒大于75个碱基。
『组成』
Taq DNA Polymerase: 500U (5U/l; 200l)
10 PCR Buffer: 1.5ml，组份为：
100 mM Tris-HCl (pH8.7)
500 mM KCl
15 mM MgCl2
0.1%白明胶
其它稳定剂和增强剂
『活性单位』
1单位酶定义为在72ºC、30min内催化10nmol同位素标记的dNTP加入到酸不溶物质所需的酶量。
『保存条件』-20℃保存。
『有效期』12个月。

『质量控制』
1. Overdigest (OD) 检测：30U Taq DNA 聚合酶与1g λDNA在72ºC下反应16小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检出降解的λDNA。
2. 切口酶检测：30U Taq DNA 聚合酶与超螺旋质粒DNA在72ºC下反应4小时后，用琼脂糖凝胶电泳未检出切口酶或线性DNA带。
3. 热稳定性检测：92ºC时，每2.5U Taq DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1小时。
4. SDS-PAGE检测纯度大于99%以上。
『适用范围』
常规PCR/反转录PCR/荧光定量PCR/DNA测序/平端PCR产物加A等。
『使用方法』
注意：以下举例多数情况下可参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。
以人基因组DNA 为模板，扩增1kb的片段，反应体系为25l。
10PCR Buffer 2.5l
Primer 1 (10M) 1l
Primer 2 (10M) 1l
dNTP (10mM) 0.5l
Taq DNA Polymerase 1~2.5U
Template 1g
ddH2O 补至25l
如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量。混匀后，置于PCR仪中，按设定的程序运行即可。反应结束后取5l反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。