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高效液相色谱仪-高压输液系统

2021.10.25

高压输液系统一般包括储液器、高压输液泵、过滤器及梯度洗脱装置等。

(1)储液器

储液器的材料应耐腐蚀,可为不锈钢、玻璃、聚四氟乙烯或特种塑料聚醚醚酮(PEEK),容积一般以0.5~2.0L为宜。使用过程储液器应密闭,以防止溶剂蒸发引起流动相的变化。

(2)高压输液泵 

高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件,其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱柱中。

高压输液泵按输送流动相的性质一般可分为恒压泵和恒流泵两大类。目前,高效液相色谱仪普遍采用的是往复式恒流泵,特别是双柱塞型往复泵,用微处理器软件精密控制柱塞运动,具有液路缓冲器,可获得较高的流量稳定性,尤其适用于梯度洗脱。

(3)过滤器 

在高压输液泵的进口和它的出口与进样阀之间,应设置过滤器。高压输液泵的活塞和进样阀阀芯的机械加工精密度非常高,微小的机械杂质进入流动相,会导致上述部件的损坏;同时,机械杂质在柱头的积累会造成柱压升高,使色谱柱不能正常工作。因此,管道过滤器的安装是十分必要的。

过滤器的滤芯是用不锈钢烧结材料制造的,孔径为2~3μm,耐有机溶剂的侵蚀。若发现过滤器堵塞(发生流量减小的现象),可将其浸入稀HNO3溶液中,在超声波清洗器中用超声波振荡10~15min,即可将堵塞的固体杂质洗出。若清洗后仍不能达到要求,则应更换滤芯。

(4)梯度洗脱装置 

高效液相色谱仪有等度洗脱和梯度洗脱两种洗脱方式,前者保持流动相组成配比不变,后者则在洗脱过程中连续或阶段地改变流动相组成,它需要配有梯度洗脱装置。梯度洗脱装置依据梯度装置所能提供的流路个数可分为二元梯度、三元梯度等,依据溶液混合的方式又可分为高压梯度和低压梯度。

高压梯度又称内梯度,目前大多数高效液相色谱仪皆配有高压梯度装置,它是用两台高压输液泵将强度不同的两种溶剂A、B输入混合室,进行混合后再进入色谱柱。两种溶剂进入混合室的比例可由溶剂程序控制器和计算机来调节。此类装置的主要优点是两台高压输液泵的流量皆可独立控制,可获得任何形式的梯度程序,易于实现自动化。低压梯度又称外梯度,先按一定程序在常压下预先将溶剂在比例阀(混合器)中混合均匀,再用泵加压输入色谱柱。其优点是只需一个高压输液泵,价廉,使用方便。表比较了各种梯度洗脱系统的特征。


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