关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

PCR 各种缓冲液的配方

2019.3.02

 



PCR 各种缓冲液的配方

电泳缓冲液

50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液        终浓度配制1L溶液

成分                                          各成分的用量

2mol/L Tris碱                            242g

1mol/L 冰乙酸                            57.1 ml

EDTA    (pH=8.0)                  18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))

水                                               补足1L

 

5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量

445 mmol/L Tris碱                     54g

445 mmol/L 硼酸盐                     27.5g 硼酸

10 mmol/L EDTA                        20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

水                                                 补足1L

 

染料

1%溴酚蓝(bromophenol blue)

加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

 

1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)

溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。

 

10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)

小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。

 

凝胶上样液(gel loading solutions)

碱性凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

0.3 N 氢氧化钠                                         300ul 10N 氢氧化钠

6 mmol/L EDTA                                         120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

18%聚蔗糖(400型)                                 1.8g

0.15%溴甲酚绿                                           15mg

0.25%二甲苯青FF                                         25mg

水                                                              补足到10ml

 

聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝                           1.5ml 1%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF                     1.5ml 1%二甲苯青FF

5 mmol/L EDTA                           100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

15%聚蔗糖(400型)                   1.5g

水                                                    补足到10ml

 

溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度                   配制10ml溶液各成分用量

0.25%溴酚蓝                         2.5ml 1%溴酚蓝

0.25%二甲苯青FF                    2.5ml 1%二甲苯青FF

15%聚蔗糖(400型)                1.5g

水                                                   补足到10ml

 

甘油凝胶上样液(4℃贮存)

成分及                                         终浓度配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝                                      1.5ml 1%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF                                1.5ml 1%二甲苯青FF

5 mmol/L EDTA                                     100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

50%甘油                                                3ml

水                                                              3.9ml

 

蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝                      1.5ml 1%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF                1.5ml 1%二甲苯青FF

5 mmol/L EDTA                     100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

40%聚蔗糖                              4g

水                                              补足到10ml

 

10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

0.2%溴酚蓝                   20mg

0.2%二甲苯青FF            20mg

200 mmol/L EDTA            4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

0.1%SDS                        100ul 10% SDS

50%甘油                           5ml

水                                     补足到10ml


推荐
关闭