PCR 各种缓冲液的配方
PCR 各种缓冲液的配方
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 终浓度配制1L溶液
成分 各成分的用量
2mol/L Tris碱 242g
1mol/L 冰乙酸 57.1 ml
EDTA (pH=8.0) 18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))
水 补足1L
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris碱 54g
445 mmol/L 硼酸盐 27.5g 硼酸
10 mmol/L EDTA 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
水 补足1L
染料
1%溴酚蓝(bromophenol blue)
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
凝胶上样液(gel loading solutions)
6×碱性凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氢氧化钠 300ul 10N 氢氧化钠
6 mmol/L EDTA 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
18%聚蔗糖(400型) 1.8g
0.15%溴甲酚绿 15mg
0.25%二甲苯青FF 25mg
水 补足到10ml
6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
15%聚蔗糖(400型) 1.5g
水 补足到10ml
6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚蓝 2.5ml 1%溴酚蓝
0.25%二甲苯青FF 2.5ml 1%二甲苯青FF
15%聚蔗糖(400型) 1.5g
水 补足到10ml
6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)
成分及 终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
50%甘油 3ml
水 3.9ml
6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
40%聚蔗糖 4g
水 补足到10ml
10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚蓝 20mg
0.2%二甲苯青FF 20mg
200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
0.1%SDS 100ul 10% SDS
50%甘油 5ml
水 补足到10ml