关于多克隆抗体的免疫方法介绍
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:
①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;
②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);
③必要时,14 天后,重复步骤②一次;
④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;
⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:
①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;
②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;
③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;
④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:
①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;
②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;
③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;
④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
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