分析测试百科网 > 行业资讯 > 技术原理

质谱技术在中草药研究中的应用

2018.3.07

敞开式离子化质谱（ambient ionization mass spectrometry，AIMS）是近年来兴起的一种无需（或稍许）样品前处理步骤，在敞开的大气环境下实现离子化的质谱分析技术。近年来，各种AIMS技术的研制与应用成为质谱领域备受关注的焦点之一。本工作综述了AIMS技术在中草药研究中的应用，对典型的分析策略进行了讨论，阐述了AIMS技术的基本原理、特点和分类，并展望了该技术在中医药研究领域未来发展的趋势和可能的影响。

敞开式离子化质谱（ambient ionization mass spectrometry，AIMS）是一种能在敞开的常压环境下直接对样品或样品表面物质进行分析的新型质谱技术，此技术无需（或者只需简单的）样品前处理，便可实现对样品的分析，具有实时、原位、高通量、简便快速、环保、可以与各种质谱仪器联用等一系列优点，同时兼具传统质谱的高分析速度、高灵敏度等特点。2004年Cooks课题组在电喷雾电离基础上首次提出解吸电喷雾电离（Desorption electrospray ionization，DESI）技术。2005年Cody等在大气压化学电离基础上研制出实时直接检测的DART（Directanalysis in real time）技术；几乎同时，谢建台等也研制出类似的电喷雾辅助激光解吸电离质谱技术。继而，AIMS的研发引起了广泛关注，各类新技术不断涌现，目前AIMS技术的种类已有40余种。为促进AIMS技术的创新和发展，由中国质谱学会和华质泰科生物技术（北京）有限公司共同主办的AIMS国际学术年会从2013年至今已经成功举办4次，引领着AIMS技术迅速向各个行业逐层渗透，深深地影响着下一代分析检测技术的开发和利用。与经典的电喷雾、大气压化学电离和大气压光电离等电离方式相比，AIMS具有溶剂消耗少、更强的耐盐和抗基质干扰能力，同时，AIMS的敞开结构和模块化设计使其可以方便的与各种质谱连接，从而大大降低了仪器购置成本。这一技术在医学、药学、食品安全、环境污染物监控、爆炸物检测、生物分子及代谢物表征、分子成像等诸多领域已展现出广泛的应用前景。因此，AIMS的基础和应用研究备受质谱学家的关注，基础研究主要围绕构建开发新型的AIMS离子源，探究研究相应的离子化机理；应用研究主要是对各种实际样品进行定性和定量分析。本工作着重综述AIMS在中草药研究中的应用，通过对典型的分析策略进行讨论，阐述AIMS技术的基本原理、特点和分类，并展望该技术在中医药研究领域未来发展的可能趋势和影响。

1.敞开式离子化质谱技术的基本原理、特点和分类

AIMS集成了样品原位解吸附、待测物实时离子化和离子传输至质量分析器三个核心步骤。下面，以DART为例，介绍离子化的基本原理：利用He或者N2作为工作气通过放电室，放电室内部的阴极和阳极之间施加一个高达几千伏的电压导致高压辉光放电，使工作气电离成为含激发态气体原子或分子、离子、电子的等离子体气流。等离子体气流流经圆盘电极，选择性地移除某些离子后被加热，加热等离子体气流从DART口喷出至样品表面，完成热辅助的解吸附和离子化过程。离子化机理一般认为包括周围气体被激发态工作气体的彭宁（Penning）电离、进而发生的质子转移以及其他类型气相离子分子反应等过程。AIMS技术不仅可在常压下对待测样品离子化，而且离子源的敞开结构易于实现物体表面的直接离子化及质谱分析。这类离子源操作简便、快捷，无需复杂的样品前处理。AIMS技术的另一重要特征是快速及高通量，通常每个样品的分析时间不超过5s，充分展现了质谱快速分析的优势，为高通量分析提供了一种新的有效途径。因此，常压敞开式离子源开辟了质谱技术在无需样品前处理的直接、快速分析，表面与原位分析等领域的广阔应用领域。

AIMS离子源按照其离子化过程和机理可以分为三大类：

1）直接电离离子源。样品直接进入高电场被电离，如，在ESI源基础上发展起来的众多离子源，包括直接电喷雾探针（Direct electrospray probeionization，DEPI）、探针电喷雾电离（Probe electrospray ionization，PESI）、纸喷雾电离（Paper spray ionization，PSI）、场致液滴电离（Field induced dropletionization，FIDI）和超声波电离（Ultra-sound ionization，USI）等；

2）直接解吸电离离子源，同时起到对样品解吸和电离的作用。包括解吸电喷雾电离（Desorption electrosprayionization，DESI）、电场辅助解吸电喷雾电离（Electrode-assisteddesorption electrospray ionization，EADESI）、简易敞开式声波喷雾电离（Easy ambient sonic sprayionization，EASI）、解吸大气压化学电离（Desorption atmosphericpressure chemical ionization，DAPCI）、介质阻挡放电电离（Dielectric barrierdischarge ionization，DBDI）、等离子体辅助解吸电离（Plasma-assisted desorptionionization,PADI）、大气压辉光放电电离（Atmospheric glow dischargeionization,APGDI）、解吸电晕束电离（Desorption corona beam ionization,DCBI）、激光喷雾电离（Laser spray ionization,LSI）等；

3）解吸后电离离子源。这是一种两步机理离子源,第1步先对被分析物进行解吸附,第2步实现被分析物的电离过程,包括气相色谱-电喷雾质谱（Gas chromatographyelectrospray ionization,GC-ESI）、二次电喷雾电离（Secondary electrospray ionization,SESI）、熔融液滴电喷雾电离（Fused droplet electrosprayionization,FD-ESI）、萃取电喷雾电离（Extractive electrospray ionization,EESI）、液体表面彭宁电离质谱（Liquidsurface Penningionization,LPI）、大气压彭宁电离（Atmospheric pressure Penning ionization,APPeI）、电喷雾激光解吸电离（Electrospray laser desorptionionization,ELDI）、基质辅助激光解吸电喷雾电离（Matrix-assisted laser desorptionelectrospray ionization,MALDESI）、激光消融电喷雾电离（Laser ablation electrosprayionization,LAESI）、红外激光辅助解吸电喷雾电离（Infrared laser-assisted desorptionelectrospray ionization,IR-LADESI）、激光电喷雾电离（Laserelectrospray ionization,LESI）、激光解吸喷雾后离子化（Laser desorption spraypost-ionization,LDSPI）、激光诱导声波解吸电喷雾电离（Laser-induced acoustic desorptionelectrospray ionization,LIAD-ESI）、激光解吸-大气压化学电离（Laser desorption-atmospheric pressurechemical ionization,LD-APCI）、激光二极管热解吸电离（Laser diode thermal desorption,LDTD）、电喷雾辅助热解吸电离（Electrospray-assisted pyrolysisionization,ESA-Py）、大气压热解吸-电喷雾电离（Atmosphericpressure thermal desorption-electrospray ionization,AP-TD/ESI）、基于热解吸敞开式电离（Thermal desorption-based ambient ionization,TDAI）、大气压固态分析探针（Atmosphericpressuresolids analysis probe,ASAP）、实时直接分析（Direct analysis in real time,DART）、解吸大气压光致电离（Desorption atmospheric pressurephotoionization,DAPPI）等。

建立一种新的方法，能够对中草药中的药效成分和杂质进行分析，这对于中草药的质量评价和质量控制有重要意义。敞开式离子化质谱技术的发展为中草药分析提供了一种快速、直接的手段。本文综述了不同类型敞开式离子化质谱在中草药分析中的应用，并对典型分析案例加以讨论，总结的应用详情列于表1。

表1.敞开式离子化质谱在中草药研究中的应用

敞开式离子化质谱技术		中草药	分析物	文献
直接电离	DI	黄连	小檗碱、黄连碱、巴马汀	10
		何首乌	2,3,5,4’-四羟基芪-2-O-葡萄糖甙-3”-O-没食子酸酯	10
		南、北五味子	五味子醇甲、五味子醇乙	10
	Tissue spray	西洋参	人参皂苷、氨基酸、二糖	11
	Leaf spray	生姜	姜辣素	12
		银杏籽	银杏毒素	12
		圣罗勒	乌索酸、齐墩果酸及其氧化产物	13
		甜叶菊叶	甜菊糖苷类	14
	Direct plant spray	八角茴香	莽草毒素	15
	Field-induced DI	长春花	长春碱、脱水长春碱	16
	iEESI	银杏叶	银杏毒素、精氨酸、脯氨酸、蔗糖	17
	Wooden-tip	贝母	贝母素、精氨酸、蔗糖	18
	Field-induced wooden-tip	黄连	小檗碱、黄连碱、巴马汀、苹果酸、柠檬酸	19
		甘草	甘草酸、甘草素	19
		黄芩	黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素、汉黄芩苷	19
		苦参	苦参素、苦参碱、苦参酮	19
	Al-foil ESI	西洋参	人参皂苷	20
		附子	苯甲酰乌头原碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱	20
	Pipette-tip ESI	黄连	小檗碱、黄连碱、巴马汀	21
		牛蒡子	牛蒡苷及其苷元、二糖	21
		莲子心	莲心碱、甲基莲心碱	21
		人参	人参皂苷	21
		西洋参	人参皂苷	21
		三七	人参皂苷	21
		北五味子	五味子甲素、乙素、五味子酯甲、酯乙	21
直接解吸电离	DESI	颠茄	莨菪碱、东莨菪碱	22
		毒参	毒芹碱类	22
		曼陀罗	16种托品烷类生物碱	22
			阿托品	23
		甜叶菊	甜菊糖苷类	24
		鼠尾草	克罗烷型二萜类	25
		青脆枝	喜树碱类	26
		吴茱萸	吴茱萸碱、吴茱萸次碱	27
		贯叶连翘	金丝桃苷类、糖类	23
			金丝桃苷类、长链脂肪酸类	28
		大麦	羟氰苷类	29
		白毛茛	小檗碱类	30
		枳壳	橙皮甙、柚皮甙、苦橙甙等黄酮类	31
	DAPCI	南、北五味子	萜品烯类	32
		人参、红参	人参皂苷	33
	DCBI	黄连	黄连素、黄连碱	34
		黄藤	黄藤素	34
		鱼腥草	别隐品碱、白屈菜红碱、原阿片碱、血根碱	34
		黄柏	药根碱	34
		粉防己	轮环藤酚碱	34
		两面针	两面针碱、白屈菜赤碱	34
解吸后电离	DART	颠茄果	阿托品、莨菪碱	35
		蒌叶	蒌叶酚	36
		芫荽	大麻素类	37
		绿薄荷	大麻素类	37
		罗勒	大麻素类	37
		乌头属药材	乌头碱类生物碱	38
		曼陀罗籽	托品碱、莨菪碱	39
		萝芙木	单萜吲哚类生物碱	40
		姜黄	姜黄素类	41
		荜澄茄果	荜澄茄油烯	42
		极细当归	藁苯内酯	43
		朝鲜当归	日本前胡素、日本前胡醇	43,44,51
		白芷	白当归脑	43
		川芎	川芎内酯	43
		槟榔子	槟榔碱、槟榔次碱	45
		延胡索	延胡索碱	45
		贝母	贝母素、去氢贝母碱	45
		钩藤	钩藤碱	45
		黄芩	黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素、汉黄芩苷	45
		人参	人参皂苷类	45
		丁公藤	东莨菪内酯	46
		制川乌	单酯和双酯型二萜类乌头碱	47
		八角茴香	莽草毒素	48
		桑叶	脱氧野尻霉素	49
		厚叶岩白菜	熊果素、岩白菜素、鞣花酸、没食子酸	50
		吴茱萸	吴茱萸碱、吴茱萸次碱	51
		北五味子	五味子素、戈米辛	51,52
	Nano-EESI	人参	人参皂苷	53
	LAESI	孔雀草	花青素、山奈酚等黄酮类	54
		鼠尾草	萜类	55
	DAPPI	鼠尾草叶	鼠尾草酸及其衍生物	56
	LAAPPI	鼠尾草	萜类	55
		枳壳	川皮苷、黄酮醇类、沉香醇	57
	PALDI	黄芩	黄芩素、汉黄芩素	58

2.1直接电离离子源

直接电离离子源是基于电喷雾原理的直接电离敞开式离子化质谱技术,将样品组织中分析物直接电离进行质谱分析。这项技术快速、直接、实时、原位,无需样品前处理,适用于中药材直接分析。主要应用技术包括：直接电离（Direct ionization）、组织喷雾电离（Tissue spray）、叶片喷雾（Leafspray）、直接植物喷雾（Direct plant spray）场致直接电离（Field-induced DI）、内部萃取电喷雾电离（Internal extractive electrospray ionizationmass spectrometry，iEESI）等。虽然这些技术的名称不同,但它们的原理和分析策略是相似的,即,将样品本身作为固体基质,应用溶剂和高电压使分析物溶解或萃取到溶剂中,液相分析物分子在高电场作用下直接电离、喷雾、产生带电液滴和离子进行质谱分析。

姚钟平课题组在固体基质下的电喷雾离子化机理与应用方面做了大量的研究工作。固体基质电喷雾电离是将中草药的粉末、混悬液、提取液附着于固体基质上用于直接电离分析,可用的固体基质包括：纯金属探针、纸三角、木片、铝箔、移液器头等。因铝箔具有惰性、不渗透性、相对刚性等特点,可以折叠承载溶剂,对粉末样品有目的性的提取,在敞开式的环境下进行电喷雾质谱分析。铝箔电喷雾质谱已经成功应用于西洋参和附子等中药粉末样品中主要成分的测定。移液器头模式的分析是将移液器头与质谱进样器和进样泵连接,在线提取进样器头中的中药粉末,加以高电压使带电有机溶剂通过中药粉末将分析物提取出来后电离,经由质谱分析。这种移液器头模式的分析已成功应用于人参、西洋参和三七中皂苷类成分、南、北五味子中木脂素类成分和多

质谱

互联网

喜欢作者我要约稿