细胞冻存和复苏的原则是什么
细胞冻存和复苏的原则是慢冻快融。细胞冻存是在超低温冷冻状态下长期保存细胞的方法。在-196℃的超低温下，细胞呈休眠状态，因而能长期保存。细胞在冷冻时，常因溶液中电解质浓度增高和冰晶形成而受到损伤，故冻存细胞须悬浮于无毒、低分子质量、高溶解度，并能迅速透入活细胞内的特定保护剂中，如甘油、二甲基亚砜、聚烯吡酮、乙二醇、葡萄糖等，其中前两种最常用。冷冻过程中的降温速度对冰晶形成有重大影响，冷冻速度太快，则细胞外结冰时，细胞内水分来不及渗出胞外，以致在胞内形成冰晶，损伤细胞；如冷却过慢，则细胞外溶液结冰时间过长，引起细胞内水分大量渗出，细胞收缩死亡。适宜的降温速度是每分钟1℃降至-70℃后，立即投入液氮罐使速冷至-196℃，可耐长期保存。
细胞的复苏是按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温。在-70℃以下的条件下，细胞内的生化反应极其缓慢，甚至停止。当恢复到常温状态下，细胞的形态结构保持正常，生化反应即可恢复。在细胞复苏的过程中，如果复温速率不当也可能引起细胞内结冰而造成细胞损失。在复苏时，一般以很快的速度升温，1～2min内恢复到常温，使细胞迅速通过最易受损的-5～0℃，细胞内外不会重新形成较大的冰晶，也不会暴露在高浓度溶质的溶液中过长时间，最大限度地减少冰晶和溶质对细胞的损伤，使复苏后的细胞保持正常的结构和功能。因此，细胞冻存和复苏的原则是慢冻快融。
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